[发明专利]一种测定食品中无机硒及有机硒的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种测定食品中无机硒及有机硒的方法，尤其是通过分别测定总硒、四价硒、六价硒含量，差减得到有机硒含量的方法，属于分析化学领域。

背景技术

硒是人体必需的微量元素之一，是谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的组成成分，具有抗氧化、抗癌、防衰老、提高人体免疫力、保护心脑血管等作用（Rotruck J T , Pope A L, Ganther H E, et al Selenium: biochemical role as a component of glutathione peroxidase. Science, 1973, 179,588-590.），硒的生物学功能的发挥主要依赖于其有机形态。无机硒毒性较大，中毒量与需要量的界限非常接近，而且吸收和利用率差，生物有效性低，因而被严格限制其使用量。有机硒更利于人体吸收利用，生物活性强，毒性低(卢 岚,鲁 兵,王春娥.保健食品中有机硒和无机硒的分析探讨.中国卫生检验杂志. 2010,20(4):767-769.)，是更高效、安全的人体补硒形式。因此，测定食品中的无机硒、有机硒含量具有重大的意义，不仅能指导消费者科学补硒，还能为食品监督部门提供食品安全的监管的技术支持。

目前，我国测定有机硒含量的方法主要也是差减法(秦 昉.植物中有机硒含量的测定.无锡轻工业大学学报.1998,17(4):74-77.)，差减法的原理是先利用不同的试剂将待测样品中的有机硒和无机硒分离，因无机硒主要以硒酸根（SeO₄^2-）和亚硒酸根（SeO₃^2-）阴离子形式存在，易溶于水。有机硒主要是与蛋白质、纤维素和碳水化合物中的C、N等结合，以大分子的有机物形态存在，所以可利用环己烷或甲苯等有机溶剂萃取出有机硒，再通过测定酸消解食品和水相提取液测定食品中总硒和无机硒的含量，差减得到有机硒的含量。此方法操作步骤繁琐，精密度差，需要两次消解，所需要的酸用量大，环境影响大，且氨基酸形态的硒依然存在水相中，不能被有机相萃取，当作无机硒的含量测定，实际差减得到的有机硒含量偏低，且此方法所用的环己烷、甲苯等有机溶剂存在一定的毒性。本发明直接测定食品中四价硒含量，六价无机硒在温和条件下还原成四价硒后测定，而氨基酸形态的硒本身就是低价态，不受反应影响。

发明内容

本发明的目的是：克服现有技术存在的不足，提供一种操作简便，环境友好型，精确度高的测定食品中无机硒及有机硒的方法。

为达上述目的，本发明借助氢化物发生原子荧光光谱或原子吸收光谱对食品中的硒进行定量分析，并通过食品中总硒测定后差减获得有机硒的含量。

本发明的技术方案是：一种测定食品中无机硒及有机硒含量的方法，其特征在于它由如下步骤组成：1. 食品中总硒的测定，2. 食品中无机硒的提取，3. 食品中四价硒的直接测定， 4.食品中六价硒的还原测定，5. 结果计算。

以下对上述技术方案进行进一步的描述。

所述的食品中总硒的测定是参照GB5009.93-2010的方法。

所述的食品中无机硒的提取，是直接用去离子水提取食品中的无机硒。

所述的食品中无机硒的提取，是将干燥研磨过的食品样品加入去离子水中超声提取，然后离心取其上清液。

所述的食品中无机硒的提取，食品样品干燥研磨粒度为过100目筛，样品与去离子水质量比为1:1，超声时间为10-50min，离心转速为5000-15000转/分钟，离心时间5-30 min。

所述的食品中四价硒的直接测定，是取上述上清液过0.22um的滤膜，利用四价硒不同浓度梯度标准系列做定量标准曲线，利用原子荧光或氢化物发生原子吸收直接测定获得四价硒含量。

所述的食品中六价硒的还原测定，是取上述上清液，加入还原剂充分混匀后，静止还原1小时以上，所选还原剂为不破坏上清液中氨基酸形态硒转变为无机硒的温和型还原剂（如抗坏血酸或碘化钾），还原剂与上清液质量体积比大于1:10。且利用原子荧光或氢化物发生原子吸收时，六价硒不同浓度梯度的标准溶液系列做同样还原处理。还原后用此标准系列做定量标准曲线对上清液中六价硒做定量。

以下是更详细描述的技术方案。

（1）食品中总硒的测定参照GB5009.93-2010的方法。