[发明专利]一种转移肿瘤缺失蛋白抑制剂多肽

说明书

技术领域

本发明属于生物化学领域，特别涉及一种转移肿瘤缺失蛋白抑制剂多肽，还涉及此多肽和多核苷酸重组质粒的制备和应用以及该多肽物质对Metastasis suppressor 1二聚化抑制作用生物活性。

背景技术

Inverse BAR（I-BAR）家族基因的表达产物蛋白能结合细胞膜，并能在细胞外刺激作用下对细胞膜的形态变化和细胞状况做出调节[Frost,A.et al.(2009)Cell 137(2):191-196.]。

Metastasis suppressor 1(以下简称Mtss1)[Lee,Y.G.et al.(2002)Neoplasia 4(4):291-294.]基因是I-BAR家族的重要成员，由于其在转移性细胞中表达异常，且对膜运动、细胞极性、胞内交织以及细胞移动具有调控功能[Mattila,P.K.et al.(2003)Journal of Biological Chemistry 278(10):8452-8459.]。

近期对人类恶性肿瘤样本的研究显示，在多种晚期膀胱癌和转移性胃癌中发现Mtss1基因表达的缺失；由于和预后不良情况成反比，Mtss1基因表达的程度可做为某些癌症患者无病生存率的诊断依据[Liu,K.et al.(2010)BMC Cancer 10:428.]。同时也有报道某些Mtss1基因过度表达以及染色体8q24.1上Mtss1基因位点扩增的肿瘤[Glassmann,A.et al.(2007)BMC Dev Biol 7:111.]。另外，Mtss1还是Sonic hedgehog（Shh）响应基因之一[Callahan,C.A.et al.(2004)Genes & Development 18(22):2724-2729.]，而Shh信号通路往往会促进作用肿瘤的发生[Bailey，J.M.et al.(2007)J Cell Biochem 102(4):829-839.]。

尽管当前的数据暗示Mtss1基因异常表达与肿瘤进展相关，但Mtss1的生理功能及其信号通路对肿瘤进展的影响尚没有得到充分阐明。Mtss1基因早先被认为与肿瘤转移有关，在某些恶性肿瘤中表达降低[Lee,Y.G.et al.(2002)Neoplasia4(4):291-294.]。该基因编码全长759个氨基酸的蛋白，其N端带有250个氨基酸组成的inverse Bin-Amphiphysin-Rvs(I-BAR)同源区，能形成扭曲的椭球形状的二聚体结构，利用该结构形成的凸面结合细胞膜[Yamagishi,A.et al.(2004)Journal of Biological Chemistry279(15):14929-14936.]。I-BAR家族蛋白在N端往往高度的保守，并且与细胞膜运动密切相关。研究表明Mtss1蛋白I-BAR区能结合PI(4,5)P2-富集的人工膜并引发丝状伪足样的膜突起[Saarikangas,J.et al.(2009)Curr Biol 19(2):95-107.]。此外，Mtss1 I-BAR能够与小GTP酶Rac相互作用，结合细胞膜并交叉连接肌动蛋白细胞骨架[Bompard,G.et al.(2005)Journal of Cell Science 118(22):5393-5403.]。Mtss1的C端还包括一个丝氨酸富集区（SRD）、一个脯氨酸富集区（PRD）和一个WASP同源2区（WH2）结构，这些位点能够结合肌动蛋白单体[Mattila,P.K.et al.(2003)J Biol Chem 278(10):8452-8459.]、皮层肌动蛋白[Lin,J.et al.(2005)Oncogene 24(12):2059-2066.]和Daam1等[Liu,W.et al.(2011)Development 138(10):2035-2047.]细胞骨架调节相关蛋白。许多证据表明Mtss1的I-BAR二聚体在其构象形成和功能发挥发面具有重要作用；针对这一位点对进行阻断，将有理由于了解Mtss1蛋白N端特殊的作用。