[发明专利]一种藏药烈香杜鹃及其制剂的质量检测方法

权利要求书

1.一种藏药烈香杜鹃质量检测方法，其特征是，所述方法包括烈香杜鹃中总黄酮含量测定的紫外分光光度方法，烈香杜鹃中总槲皮素含量测定的高效液相色谱方法，和烈香杜鹃中黄酮类成分HPLC指纹图谱的检测方法中的一种或几种。

2.如权利要求1所述的质量检测方法，其特征是，所述质量检测方法包括以下一种或几种：所述总黄酮的含量测定方法是以金丝桃苷制成对照品溶液，经黄酮的亚硝酸钠和硝酸铝的显色反应，通过紫外-可见分光光度法测定不同对照品浓度的吸收度并绘制吸收曲线；将烈香杜鹃粉末经石油醚除杂后配制供试品溶液，经过硝酸铝显色法显色后，通过紫外-可见分光光度法测定其吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中总黄酮的含量的方法；

所述总槲皮素含量测定方法是以槲皮素对照品为对照，烈香杜鹃使用酸水解后，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积份数比45:55的甲醇-体积份数比0.5%磷酸水溶液为流动相，检测波长为360nm的高效液相色谱法；

所述黄酮类成分HPLC指纹图谱的检测方法，其是以槲皮素、山奈素、金丝桃苷、芦丁对照品为对照制成四种参照物溶液；色谱条件是：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以异丙醇为流动相B，以体积份数比0.5%磷酸水溶液为流动相C，梯度洗脱，流速为1ml/min，检测波长为360nm；将参照物溶液与供试品所制备的供试品溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图，比较参照物溶液与供试品溶液的相对保留时间和相对峰面积。

3.如权利要求2所述的质量检测方法，其特征是，所述总黄酮的含量测定方法如下：

对照品溶液的制备取金丝桃苷对照品15mg，精密称定，置25ml量瓶中，加乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀；精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得；

标准曲线的制备精密量取对照品液1ml、2ml、3ml、4ml与5ml，分别置25ml量瓶中，各加水至5ml，加重量体积份数比5%亚硝酸钠试液1ml，混匀，放置6分钟，加重量体积份数比10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（《中国药典》2010年版一部附录ⅤA），在500nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，对照品浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法取本品细粉约1g，精密称定，置圆底烧瓶中，加石油醚50ml，加热回流1小时，过滤，滤渣洗涤3次，每次10ml，弃去石油醚液，滤渣挥干溶剂后，置圆底烧瓶中，精密加入乙醇50ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液1ml，置25ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀；精密量取5ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至5ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中金丝桃苷的含量（μg/ml），计算，即得。

4.如权利要求2所述的质量检测方法，其特征是，所述总槲皮素含量测定方法如下：

照高效液相色谱法；

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比45:55的甲醇-体积份数比0.5%磷酸水溶液为流动相；检测波长为360nm；理论板数按槲皮素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备取槲皮素对照品适量，精密称定，加体积份数比3:1的乙醇-5mol/L盐酸水溶液混合溶液制成每1ml含槲皮素150μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备取本品细粉约1g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入体积份数比3:1的乙醇-5mol/L盐酸水溶液混合溶液50ml，密塞，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用体积份数比3:1的乙醇-5mol/L盐酸水溶液混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。