[发明专利]黄瓜嫩果白色果皮基因w连锁的SSR标记及其应用有效
| 申请号： | 201210298883.X | 申请日： | 2012-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN102827837A | 公开（公告）日： | 2012-12-19 |
| 发明（设计）人： | 顾兴芳;张圣平;苗晗;王烨;董邵云 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 张涛 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 黄瓜 白色 果皮 基因 连锁 ssr 标记 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.黄瓜嫩果白色果皮基因w连锁的SSR标记，序列如下SSR06791-F/SSR06791-R:TTTGTAGTTTGAGAACTCAAGTTGG/TGGTGTTTGGTTGTCCTGAG其扩增的特征条带分别如Seq ID No.1、Seq ID No.2所示。
2.权利要求1所述的SSR标记在筛选具有嫩果白色果皮基因w的黄瓜种质资源中的应用，其步骤如下：
（1）采用上述SSR标记为引物对待选黄瓜品种的基因组DNA分别进行PCR扩增，
（2）对扩增结果进行凝胶电泳检测；
（3）从检测结果中筛选扩增出如SEQ ID No.2所示的片段的材料。
3.根据权利要求2所述的应用，所述PCR反应体系为:7.5ng DNA，正向和反向引物各50ng，5μL GoGreen Master Mix，加双蒸水至10ul。
4.根据权利要求2所述的应用，所述PCR扩增程序为：94℃预变性4分钟；94℃变性15秒，55℃退火15秒，72℃延伸30秒，35个循环；72℃保温5分钟，16℃保存。
5.根据权利要求2～4任一所述的应用：所述凝胶电泳检测指采用6％的非变性聚丙烯酰胺凝胶，于160V恒功率电泳分离，最后银染显色。
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