[发明专利]一种高活性壳聚糖酶及其制备方法有效
| 申请号： | 201210300876.9 | 申请日： | 2012-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN102816751A | 公开（公告）日： | 2012-12-12 |
| 发明（设计）人： | 徐泽平;马韵升;史庆苓;张心青;王秀芝;虞凤慧;高洪奎 | 申请（专利权）人： | 黄河三角洲京博化工研究院有限公司;山东京博控股股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12R1/085 |
| 代理公司： | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人： | 苗峻 |
| 地址： | 256500 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 活性 聚糖 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种高活性壳聚糖酶，其特征在于：是由保藏号为CGMCC No.6129的菌株发酵获得的。
2.一种高活性壳聚糖酶的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）菌种发酵产酶：菌种活化后，经液体发酵扩繁种子液，再利用发酵方法生产得到壳聚糖酶粗酶液；
其中所述的发酵方法为液体发酵或固体发酵；
所述的粗酶液为液体发酵的发酵液，或固体发酵后的鲜料或干燥粉碎后的干料，用缓冲液抽提出的酶液；
（2）壳聚糖酶纯化：步骤（1）获得的粗酶液，经离心除杂、微滤除菌、超滤膜超滤浓缩得酶浓缩液，将所得到的浓缩液用乙醇醇沉，收集沉淀，得湿固酶；
（3）干燥：对湿固酶进行低温真空干燥，即得高活性壳聚糖精酶；
其中所采用的菌种为蜡状芽胞菌株，Bacillus cereus,其保藏号为CGMCC No.6129；
所述步骤（1）中的缓冲液为乙酸-乙酸钠缓冲液或磷酸盐缓冲液或酸性硫酸铵缓冲液。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中的醇沉过程所使用的醇的温度为室温。
4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中的醇沉过程所使用的醇为95wt%的乙醇。
5.如权利要求1所述的壳聚糖酶，其特征在于：其酶活达到25000U/g，酶活收率35%以上。
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