[发明专利]OB基因用作为鹅脂肪性状遗传标记的用途

说明书

技术领域

本发明涉及鹅的分子生物学技术及育种领域，具体是涉及测定与腹脂重和腹脂率等相关特征的遗传标记的存在，更具体地说，是涉及测定显示该些特征的OB基因的差异，再进一步具体地说，是测定OB基因中的多态性，即与腹脂重和腹脂率相关的鹅OB(obese)基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism，缩写为SNP)的存在。

背景技术

现代家禽遗传育种理论和应用的发展，使肉用家禽特别是肉鸡、肉鸭的生长速度和饲料效率大幅度提高，生产效率与工厂化生产逐相适应。但同时也容易带来胴体腹部脂肪和皮下脂肪的大量沉积，导致饲料能量的浪费和胴体品质不佳。

OB(obese)基因编码一种瘦蛋白质(Leptin)的肽类激素，可抑制脂肪蓄积和维持脂肪细胞大小正常。目前有许多关于人、鼠OB基因以及少量关于猪OB基因的研究报道，但家禽OB基因的研究报道还鲜见。OB(obese receptor)基因在Lepein的信号转导起极重要作用，它与机体脂肪沉积有关，故OB基因可作为脂肪沉积候选基因。鸡OB基因的cDNA于1998年Taouis等克隆和测序，编码长度492bp，编码163个氨基酸，含18个氨基酸信号肽，成鸡Leptin由146氨基酸组成。Ashwell等用Northern检测发现，鸡的Leptin在脂肪组织和肝脏中都有表达。鸡OB的cDNA于2000年Guy Horev等和Takeshi等被克隆，与其他哺乳动物OB核苷酸序列的同源性平均为60％，Dunn等将鸡的OB基因定位于8号染色体上。顾志良等报道了对鸡的OB基因的外显子9的部分序列进行克隆和测序，发现一个碱基有突变，产生了多态性，但氨基酸序列没有改变(沉默突变)。顾志良等进一步用PCR-SSCP方法研究不同品种鸡的OB基因表明：北京油鸡AA基因型频率与其它鸡种存在差异，高脂系A基因频率比低脂系高，并推测基因A可能与沉积较多腹脂有关。李志辉等研究结果表明，鸡OB基因外显子9的SNPs基因型对肉鸡腹脂重和腹脂率有显著影响，可以用于鸡脂肪性状的标记辅助选择。

目前，有关鹅的DNA遗传标记、遗传多样性和相关功能基因的研究相对鸡来说还很少，且没有关于鹅OB基因的研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对上述现有技术的不足，提供一种OB基因及其作为鹅脂肪性状遗传标记的用途；同时筛选与鹅脂肪沉积相关的SNP，以期应用于标记辅助选择或标记辅助渗入，并提供上述遗传标记在鹅标记辅助选择中的应用。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种OB基因，是与表示鹅脂肪性状的腹脂重和腹脂率和相关的基因。上述OB基因序列的第151bp处有一个A→G的突变，导致多态性的存在。

克隆OB基因和检测151A-151G碱基处突变所用引物的序列如下：

正向引物：5′-TGCCAGATCTTCCAGGATGA-3′，

反向引物：5′-GAGATTCTGAGGTCATTGGC-3′。

上述OB基因在鹅遗传标记辅助选择中的应用。

一种鉴定鹅脂肪性状的遗传标记的方法，该鹅具有与表示鹅脂肪性状的腹脂重和腹脂率相关的基因，该方法包括测定从鹅获得的核酸样品中OB基因中多态性的存在，该多态性是与表示鹅脂肪性状指标的腹脂重和腹脂率相关的多态性，该多态性在OB基因序列的58bp处有一个T→G的突变。

上述方法包含克隆得到一个如权利要求1所述OB基因的DNA序列，扩增目的片断长度226bp，第58碱基处有一个碱基突变T58-G58。

克隆OB基因和检测T58-G58碱基处突变所用引物的序列为：

正向引物：5′-TGCCAGATCTTCCAGGATGA-3′，

反向引物：5′-GAGATTCTGAGGTCATTGGC-3′。

上述方法在鹅育种中的应用。

现代家禽遗传育种理论和应用的发展，使肉用家禽特别是肉鸡、肉鸭的生长速度和饲料效率大幅度提高，生产效率与工厂化生产逐相适应。但同时也容易带来胴体腹部脂肪和皮下脂肪的大量沉积，导致饲料能量的浪费和胴体品质的不佳。针对这个问题，本发明人选择鹅作为研究对象，采用分子生物学的方法筛选鹅脂肪性状相关基因，其步骤如下：