[发明专利]人USP14基因的用途及其相关药物

说明书

本发明公开了人USP14基因的用途及其相关药物。本发明公开了人USP14基因在肿瘤治疗、肿瘤诊断及药物制备中的用途。本发明还进一步构建了人USP14基因小分子干扰RNA、人USP14基因干扰核酸构建体、人USP14基因干扰慢病毒并公开了他们的用途。本发明提供的siRNA或者包含该siRNA序列的核酸构建体、慢病毒能够特异性抑制人USP14基因的表达，尤其是慢病毒，能够高效侵染靶细胞，高效率地抑制靶细胞中USP14基因的表达，进而抑制肿瘤细胞的生长，促进肿瘤细胞凋亡，在肿瘤治疗中具有重要意义。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地涉及人USP14基因的用途及其相关药物。

背景技术

去泛素化酶主要有两大类，包括泛素羧基端水解酶（ubiquitin C-terminalhydrolases,UCH）和泛素特异性加工酶（ubiquitin-specific processing proteases，UBP或USP）。去泛素化调节酶调节细胞内的一系列生化反应，包括细胞的生长分化，肿瘤形成，细胞周期调控，转录激活和信号转导等（Ramakrishna S,Suresh B,Baek KH.The role ofdeubiquitinating enzymes in apoptosis.Cell Mol Life Sci 2011;68:15-26.Grillari J,Grillari-Voglauer R,Jansen-Dürr P.Post-translationalmodification of cellular proteins by ubiquitin and ubiquitin-like molecules:role in cellular senescence and aging.Adv Exp Med Biol 2010;694:172-196.）。

USP14(Ubiquitin-specific protease 14)，也称为tRNA鸟嘌呤糖基转移酶(tRNA-guanine transglycosylase,TGT)的一个60KD的亚基(USP14/TGT60kD)，属于泛素特异性加工酶家族，位于人类染色体18p11区域（Deshpande KL,Seubert PH,Tillman DM,Farkas WR and Katze JR:Cloning and characterization of cDNA encoding therabbit tRNA-guanine transglycosylase 60-kilodalton subunit.Arch BiochemBiophys 326:1-7,1996.）。有研究发现，USP14在白血病细胞和大肠癌细胞中都有表达，诱导这些细胞分化后，USP14的表达量会下降。（Ishiwata S,Katayama J,Shindo H,Ozawa Y,Itoh K and Mizugaki M:Increased expression of queuosine synthesizing enzyme,tRNA-guanine transglycosylase,and queuosine levels in tRNA of leukemiccells.J Biochem 129:13-17,2001.Ishiwata S,Ozawa Y,Katayama J,et al:Elevatedexpression level of 60-kDa subunit of tRNA-guanine transglycosylase in coloncancer.Cancer Lett 212:113-119,2004.）。Shinhi等人通过免疫组化的方法发现，在正常的大肠上皮细胞中几乎检测不到USP14的表达，但是，在99例大肠癌病人中，有18例病人的大肠癌组织中能检测到USP14的高表达，而且其表达量随着病理学等级增加而增加（ShenjiS,Naito Z，ISHIWATA S，et al.Ubiquitin-specific protease 14 expression incolorectal canceris associated with liver and lymph node metastases.OncologyReports.2006;15:539-543.）。另外还有研究发现，USP14在肝内胆管癌组织样本中呈现高表达，而在正常的样本中只有很弱的表达（Chuensumran U,Saelee P,Punyarit P,etal.Ubiquitin-specific Protease 14 Expression Associated withIntrahepaticCholangiocarcinoma Cell Differentiation.Asian Pacific J CancerPrev.2011;11:775-779.）。以上研究提示，USP14可能参与了大肠癌和胆管癌的发生和发展，有望成为大肠癌和胆管癌肿瘤基因治疗的一个新的靶点。