[发明专利]抗猪圆环病毒和猪传染性胸膜肺炎感染疫苗组合物及制备

说明书

技术领域

本发明属于畜牧类生物制药技术领域，涉及一种抗猪圆环病毒2型和猪传染性胸膜肺炎感染的二联疫苗组合物及其制备方法。 

背景技术

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）引起的一种呼吸系统重要传染病。本病主要引起猪的一种伴有胸膜炎的纤维素性、出血性、坏死性肺炎，多呈最急性或急性病程而迅速死亡，发病率和死亡率均在50%以上，它可发生于任何年龄的猪只，尤其是在集约化养猪场，一旦发生会造成重大经济损失。 

临床上一般分为最急性、急性、亚急性和慢性。最急性型多发生在断奶仔猪群中，一头或几头猪突然发病，病猪体温高达41.5℃，精神沉郁，食欲不振，有短暂的腹泻或呕吐，剖检后病理变化主要存在于呼吸系统，最急性或急性迅速死亡的猪只气管和支气管内充满泡沫状血样粘性渗出物、肺充血、水肿，肺炎病灶变暗，变硬，质地脆弱，纤维素性胸膜炎区呈现暗红色或发黑。 

猪胸膜肺炎放线杆菌最早被称为副溶血嗜血杆菌（H.parahaemolyties），该病原菌生长要求严格，为革兰氏阴性球杆菌，有荚膜。该病原菌血清型众多，根据辅酶Ⅰ（Nicotinamide Adenine Dinucleotide，NAD）依赖性，可以分为生物I型和生物II型，其中依赖NAD的猪胸膜肺炎放线杆菌划为生物I型（Biovar I），不依赖NAD的猪胸膜肺炎放线杆菌划为生物II型（Biovar II），采用传统血清型方法，又可细分为15个血清型。其中生物I型包括血清1~12型和15型，生物II型包括血清13型和14型。 

目前该病的预防主要是对流行区域进行病原菌的分离鉴定，确定流行的优势血清型，研制具有特异性保护作用的灭活疫苗，并制订相应的防治对策，是许多国家所采用的方法。但是该病原血清型众多，给该病的预防与控制带来了困难，因此，血清型的划分及其所采用的方法显得非常重要。 

猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type2，PCV2）不仅可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS），而且还与猪皮炎与肾病综合征（Porcine dermatitis and nephropathy syndrome,PDNS）、猪呼吸道疾病综合征（Porcine respiratory disease syndrome,PRDC）、猪先天性振颤、母猪繁殖障碍、猪增生性和坏死性肺炎等疾病密切相关。自从20世纪90年代发现可致病猪以来，PCV2病毒在世界各国迅速蔓延。目前PCV2在猪群中感染率 非常高，造成猪的生长缓慢，饲料报酬下降，同时侵害猪的免疫系统，导致猪的免疫机能下降，造成其它疾病的大爆发，给世界养猪业造成了巨大的经济损失。我国在2000年检测到了该病毒的存在，该病毒在我国猪群的感染率近乎50%，给我国的养猪业也造成了严重的打击。 

PCV2为单股环状的DNA病毒，无囊膜，20面体对称，基因组全长1767bp或1768bp，整个基因组包括11个开放阅读框（Open reading frame,ORF），其中ORF1和ORF2为两个主要阅读框。ORF1与同属的猪圆环病毒1型（PCV1）高度同源，编码与病毒复制相关的酶类。而ORF2在PCV1和PCV2之间差异相对较大，编码分子量约为30kDa的主要结构蛋白（衣壳蛋白）（Capsid protein，CP）能够与PCV2感染的猪血清特异性结合，并且具有中和活性。 

目前对于该病毒的防制主要是依靠疫苗，国外只有梅里亚动物保健公司（Merial）生产全病毒灭活苗，但只适用于母猪免疫；国内均为全病毒灭活苗，且应用的佐剂均含有一定量的矿物油；PCV2亚单位疫苗目前有两家公司生产，勃林格殷格翰动物保健有限公司（Boehringer Ingelheim Vetmedica，Inc.，美国）的FLEX系列茵格发（Ingelvac）猪圆环病毒疫苗和英特威/先灵葆雅动物保健公司(intervet/schering-plough)的PCV2疫苗；富道动物保健公司（Fort Dodge）研制的PCV2疫苗属于嵌合病毒灭活苗。