[发明专利]小鼠胎肝细胞PL08及其建立方法和在红细胞前体细胞培养与增殖中的应用有效
| 申请号： | 201210316587.8 | 申请日： | 2012-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN102965334A | 公开（公告）日： | 2013-03-13 |
| 发明（设计）人： | 李鹏;刘志新 | 申请（专利权）人： | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073;C12N5/078 |
| 代理公司： | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人： | 刘孟斌 |
| 地址： | 510000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 小鼠 肝细胞 pl08 及其 建立 方法 红细胞 体细胞 培养 增殖 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.小鼠胎肝细胞PL08CCTCC No.C201297。
2.小鼠胎肝细胞PL08的建立方法：
a.取C57/BL6小鼠第11天的胎肝，用带有27G针头的无菌注射器反复吹打，以使组织解离，分散为单个细胞；
b.用红细胞裂解液去除红细胞后，将细胞培养在0.1％明胶包被过的细胞培养板上，培养基成分为：aMEM培养基，添加10％-15％的胎牛血清；
c.经过4到5天的培养，去除上清，将贴壁细胞用0.05％的胰酶消化下来，常规方法扩大培养、传代，每次传代过程中保留30％的原培养液，添加70％的新鲜培养液。
3.根据权利要求2所述的建立方法，其特征在于细胞培养、传代的温度为37摄氏度，PH值为7.2。
4.小鼠胎肝细胞PL08在脐带血红细胞前体细胞体外培养中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于在体外培养和增殖脐带血红细胞前体细胞。
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