[发明专利]小鹅瘟卵黄抗体冻干保护剂

说明书

技术领域

本发明属于家禽抗体保存技术领域，具体涉及一种小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂、及其制备方法和应用。

背景技术

小鹅瘟，又称鹅细小病毒感染，是雏鹅的一种急性败血性传染病，可经消化道和呼吸道感染，并可经卵垂直传播。患病鹅精神萎顿、食欲废绝、严重下痢，有时出现神经症状。目前本病呈世界性分布，主要发生于20日龄以内的雏鹅，发病率和死亡率可达90-100%,且发病日龄越小，死亡率越高，对养鹅业的发展影响极大。雏番鸭亦可感染小鹅瘟病毒，并有类似的临床表现。

小鹅瘟卵黄抗体是用小鹅瘟疫苗多次免疫蛋禽，当达到一定程度后收集禽蛋经提取纯化后制备的抗体制剂。其可有效预防和治疗小鹅瘟病毒引起的鹅群相关疾病，减轻小鹅瘟造成的危害，在临床上得到广泛应用。目前，国内小鹅瘟卵黄抗体都是经稀释分装而成的液体剂型，存在着体积大，运输不便，需低温保存和运输。由于反复冻融和运输不当很容易造成效价降低，而冷冻干燥能使萃取抗体在预先冷冻的状态下，不经液态直接升华除去水分而获得冻干制剂，它避免了液态下保存的抗体易失活易变性的缺点，使产品质量稳定，体积缩小，便于运输及长时间保存。目前常用的冻干保护剂种类有多羟基化合物、糖类、蛋白质、聚合物、氨基酸、盐和表面活性剂等。但鉴于畜禽养殖用药开发的特点，冻干保护剂成本不能太高、冻干操作要简单。因此，研发出一种配方简单、成本低廉、能够批量制备的小鹅瘟卵黄抗体冻干保护剂就显得尤为迫切和重要。

发明内容

本发明的目的是提供一种小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂及其制备方法，从而弥补现有技术的不足。

本发明的小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂，为包含有明胶、海藻糖、甘氨酸的蒸馏水溶液。

上述的冻干保护剂，各组分浓度质量体积百分比g/ml为：0.5-2%明胶、4-7%海藻糖和0.8-1.2％甘氨酸。

上述冻干保护剂配方各组分浓度优选为：1%明胶、6%海藻糖和1％甘氨酸。

上述的冻干保护剂中还加入有大豆蛋白胨，加入的大豆蛋白胨的质量体积百分比g/ml浓度为5-10%，优选为8%。

将小鹅瘟卵黄抗体与上述冻干保护剂以提及比7:1比例混合，作为小鹅瘟卵黄抗体冻干液体。

本发明的冻干保护剂组分简单、成本低廉、易于制备。从而解决了小鹅瘟卵黄抗体的长途运输、保存的低温储存难题。使用效果表明本发明的冻干保护剂可使小鹅瘟卵黄抗体在2-8℃下保存12个月以上，25℃下保存6个月以上。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步描述本发明，但这些实例仅是范例性的，并不对本发明中应用的常规技术作限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明的技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明保护范围内。

实施例1  小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂配制

在100ml的蒸馏水中加入1g明胶、6g海藻糖、1g甘氨酸后，使各组分充分溶解后，调pH 值至7.2～7.4，经灭菌处理后，2～8℃保存备用。

实施例2 小鹅瘟卵黄抗体的冻干保护剂配制

在100ml的蒸馏水中加入1g明胶、6g海藻糖、1g甘氨酸和8g大豆蛋白胨后，使各组分充分溶解，调pH 值至7.2～7.4，经灭菌处理后2～8℃保存备用。

实施例3  小鹅瘟卵黄抗体的冻干

将小鹅瘟卵黄抗体与上述实施例1制备的冻干保护剂以体积比7:1比例混合，作为小鹅瘟卵黄抗体冻干液体。预冻阶段：冻干液体常温进箱，1小时将制品降至-40℃并维持4小时。升华阶段：1小时将制品从-40℃升至-8℃并维持14小时。解吸干燥阶段：0.5小时将制品从-8℃升至28℃并维持10小时，冻干全程30.5小时。

实施例4 小鹅瘟卵黄抗体的冻干制剂的性状、剩余水分和抗体效价

将冻干后小鹅瘟卵黄抗体的冻干制剂分别放置2-8℃和25℃环境下保存，定期观察抗体的性状、剩余水分和效力。性状、剩余水分检测方法参见现行《兽用生物制品检验规程》，抗体效价采用双向琼脂扩散试验（AGP）：

打孔：将制备好的琼脂板按模板用打孔器打孔，并挑出孔中的琼脂。中心1孔，周围6孔，孔径3 mm，孔距4 mm，用熔化琼脂补孔底。

加样：中央孔加入标准琼扩抗原，周围孔分别加入2倍系列稀释的待检小鹅瘟卵黄抗体，各孔加样25μl。将加样后的琼脂板放入填有湿纱布的盒内，置20-25℃室温或37℃温箱，24 h初判，72 h终判。