[发明专利]TRPC5作为药物靶点在逆转肿瘤多药耐药中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及TRPC5的一种新用途，尤其涉及瞬时受体电位通道TRPC5作为药物靶点在逆转肿瘤多药耐药中的应用。

背景技术

肿瘤多药耐药（multidrug resistance，MDR）是指肿瘤细胞接触某种抗肿瘤药物后，不仅对该药物产生耐药性，而且对结构和作用机制不同的多种抗肿瘤药物产生交叉耐药性，从而大大降低了抗肿瘤药物的疗效。多年来研究者发现了多种MDR产生机制，其中，由多药耐药基因MDR1编码的P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）是目前研究最多也是最为重要的多药耐药相关蛋白。P-gp在肿瘤组织中总体表达水平较低，但在恶性肿瘤中有却有一定水平的表达，尤其是在耐药肿瘤组织中其表达量明显上调。P-gp的功能可归如下：一方面，P-gp是一种细胞膜ATP依赖泵，可结合并以耗能的方式排出多种药物，从而降低细胞内药物浓度，使其产生耐药性；另一方面，P-gp可能是钙离子通道的一部分，钙通道阻滞剂和一些钙调蛋白抑制剂均可与P-gp结合，通过屏蔽P-gp来提高细胞内的药物浓度，从而增加多药耐药肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感性。P-gp主要介导亲脂性抗肿瘤药物引起的MDR，包括抗生素类如多柔比星/阿霉素（ADM）、丝裂霉素（MMC）,植物类药物如长春新碱（VCR）、依托泊苷（Vp216）等。

到目前为止设计和筛选出的肿瘤MDR逆转剂大多以P-gp作为靶点，主要包括以下三代：

（1）第一代逆转剂：维拉帕米和环孢菌素A

维拉帕米和环孢菌素A是被最早被发现的可在体外抑制MDR1介导MDR的药物，但其在临床上出现的剂量依赖性副作用严重限制了它们的应用；

（2）第二代逆转剂：dex-维拉帕米、valsodar（PSC833）、bricoda（VX-710）

  比第一代逆转剂的逆转活性更强，但该类逆转剂能同时抑制P-gp介导的胆汁排泄和肠道转运，并与抗肿瘤药物竞争性结合细胞色素P-450，从而抑制药物的肝肠代谢，导致抗肿瘤药物的毒性增大。

（3）第三代逆转剂：Tariquidar（XR9576）、Zosuquidar（LY335979）、Laniquidar（R101933）

  第三代逆转剂通过直接与P-gp结合，使其丧失外排抗肿瘤药物的功能，从而逆转多药耐药，但该类逆转剂仍处于临床试验阶段，尚不成熟。

综上所述，目前大部以P-gp为作用靶点的MDR逆转剂都具有严重的毒副作用，因而阻碍了它们的临床应用，因此，寻找新的肿瘤耐药相关靶点，并在此基础上设计筛选出高效低毒的多药耐药逆转剂亟不可待。

瞬时受体电位通道（transient receptor potential channels，TRP通道）是位于细胞膜的一类非常重要的非选择性阳离子（主要为钙离子和钠离子）通道，最早被发现于果蝇视觉系统，在哺乳动物，已发现28种TRP通道亚型，分属于6个亚家族：TRPC、TRPV、TRPM、TRPA、TRPP和TRPML，其调节机制各异，涉及功能广泛，参与多种疾病的病理生理过程。其中，TRPC(Cannonical TRP)，即传统型TRP通道，包括TRPC1-7共七个亚型，主要参与细胞膜受体激活磷脂酶C后所介导的钙离子进入。TRPC5主要分布于脑、肺、睾丸和胎盘，并主要参与生长锥的形成和脑的发育，近几年来研究表明很多TRP通道均参与细胞的生存、增殖和死亡等基本生命活动，随着研究的深入，有理由相信TRP通道将会参与更多疾病的病理生理过程。

    目前，国内外未见有TRPC5作为药物靶点在逆转肿瘤多药耐药中的应用。

发明内容

针对现有技术存在的上述的缺陷，本发明的目的在于提供TRPC5的一种

新用途，即：TRPC5作为药物靶点在逆转肿瘤多药耐药中的应用。

所述药物为TRPC5抑制剂，包括TRPC5的药理学拮抗剂2-APB、TRPC5的阻断型抗体T5E3、TRPC5的SiRNA或TRPC5的显性抑制质粒，其中，所述TRPC5的显性抑制质粒包括pCDNA6-TRPC5-DN、Lenti-TRPC5-DN。

所述肿瘤多药耐药是由P-gp介导产生。

本发明的有益技术效果为：