[发明专利]一种连续增菌培养鸡毒支原体培养基及制备方法无效
申请号: | 201210319975.1 | 申请日: | 2012-08-31 |
公开(公告)号: | CN103060221A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 南京天邦生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/35 |
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地址: | 211102 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 连续 培养 支原体 培养基 制备 方法 | ||
1.一种连续增菌培养鸡毒支原体培养基及制备方法,所述疫苗经鸡毒支原体培养基配制、种子制备、制苗菌液连续增菌培养及灭活疫苗制备工序制成,其特征在于,所述鸡毒支原体培养基按如下工艺配制:
PPLO肉汤 20.0-25.5g
酵母浸出粉 3-7g
葡萄糖 7-9g
质量浓度为0.4%的酚红溶液 2ml
加去离子水 700—800ml
121℃高压灭菌15分钟 4℃保存;
培养时,再加150-200ml猪血清和1000单位/ml青霉素,20%NaOH调pH7.6-7.8。
2.根据权利要求1所述的连续增菌培养鸡毒支原体培养基的制备方法,其特征在于,所述培养制苗用培养基的制备按如下步骤进行:
(1)将鸡毒支原体生产用种子按1︰10的比例接种于所述的鸡毒支原体培养基中,在36-37℃培养18-24h收获;以同样方法将收获的培养液按1︰10的比例再接种传代1次;
(2)将上述传代后的菌液按1︰10的比例接种于本发明的连续增菌培养基中,37℃培养,待pH下降至6.5左右,添加连续增菌培养鸡毒支原体培养基为原培养体积的30%,用20%NaOH调pH7.6-7.8,如此进行两次增菌培养,待第二次增菌培养pH下降到6.4时,加甲醛灭活,连续增菌培养结束。
3.根据权利要求1和2所述的连续增菌培养鸡毒支原体培养基的制备方法,包括鸡毒支原体所有灭活疫苗抗原的制备。
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