[发明专利]制备、分离及超低温保存子宫内膜/月经细胞

说明书

本申请为2008年3月3日提交的申请号为200880014529.1名称为“制备、分离及超低温保存子宫内膜/月经细胞”的中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本案主张美国临时申请案2007年3月1日申请的第60/904,836，2007年3月20日申请的第60/918,961号，2007年9月17日申请的第60/994,166号，2007年10月9日申请的第60/998,255号，2008年1月22日申请的第61/011,881号及2008年2月29日申请的第__号的优先权，前述每一案的名称为″Procurement，Isolation，and Cryopreservation of Endometrial/Menstrual Cells″其整体内容系以引用方式并入本文。

本发明通常涉及关于获得月经干细胞(MSC)的方法、制程及系统。本发明尤其涉及关于取得及处理月经期间所获得的血液、体液及组织以分离及收集月经干细胞群的方法、制程及系统，这些月经干细胞可经超低温保存或经由各种培养及选择步骤进一步处理以获得为超低温保存或为治疗或药妆用途作准备的MSC。本发明还涉及关于包含至少一个月经干细胞的相关组合物。

背景技术

干细胞固有地具有经由控制细胞与细胞接触及内在信号而经历活体内细胞分裂及细胞分化的能力。已显示干细胞能藉由经局部环境因子刺激来控制细胞接触及内在信号而活体外分裂及分化成多种细胞。应了解，干细胞可获自若干来源，包括多种成人组织(诸如骨髓)以及胚胎组织。

某些干细胞表达为c-kit受体、青灰因子(Steel factor)受体及干细胞因子受体的抗原因子CD117。c-kit的基因编码干细胞因子(SCF)的酪胺酸激酶生长因子，其亦称为肥大细胞生长因子且为血细胞生成、黑素生成及生育力所必需。应了解，CD117在造血干细胞、肥大细胞、生殖细胞、黑素细胞、某些基底上皮细胞、乳房的腔室上皮细胞及胃肠道的Cajal间质细胞中表达。CD117在生殖细胞确立、维持及功能方面具有关键作用。研究指示在胚胎性腺中，CD117及其相应配位体SCF为原胚生殖细胞存活及增殖所必需。另外，研究指示CD117及其相应配位体SCF为响应促性腺激素产生配子所必需。换言之，与配位体SCF组合的CD117为睾丸生殖细胞、精原细胞的存活和增殖以及为卵母细胞的生长和成熟所必需。研究还指示CD117为活体外原始造血细胞增殖的有效生长因子。

干细胞的治疗应用以骨髓的早期实验起始。近一个世纪前，医师将骨髓经口投于患有贫血及白血病的患者。尽管该疗法并不成功，但实验室研究者最终证实可以将取自其它小鼠的骨髓输注至具有缺陷性骨髓的小鼠的血流中而使其恢复健康。这促使医师推测将骨髓自一人移植至另一人(同种异体移植)是否可行。来自骨髓及脐带的干细胞已广泛地主要用于造血移植以治疗多种疾病。自利用骨髓的第一干细胞移植出发，已鉴别出干细胞的其它来源，包括羊水、胎盘、脐带、带内膜、花顿氏胶(Wharton′s Jelly)、脂肪及上皮细胞。

当研究者遇到由细胞的身体排斥反应(稍后表征为移植物抗宿主疾病(GVHD))所引起的疾病及/或死亡时，人类免疫系统的作用，亦即防卫本身免受感染及外来物质的身体固有机制，成为早期移植中的关键考虑因素。直至发现人类组织兼容性抗原与人类免疫系统之间的关系之后才以较大规模尝试在人类中进行骨髓移植。体内大多数细胞表面上所发现的这些蛋白质被称为人类白血球抗原或HLA抗原。身体免疫系统使用这些HLA抗原以鉴别哪些细胞属于体内且哪些不属于。每当免疫系统不识别细胞上的抗原时，其即产生抗体及破坏细胞的其它物质。身体寻找且破坏的对象为致感染细菌、病毒、肿瘤细胞及外来对象(诸如碎片)。以此方式，免疫系统防卫身体抵抗可进入体内且引起损害的物质。视治疗所靶向的疾病病况而定，利用个体自身干细胞的自体移植可具有由准确HLA匹配效益所产生的某些潜在优势。供体与受体的HL A抗原匹配愈接近，所捐赠骨髓的T细胞(免疫系统细胞)将反抗患者身体的可能性愈小。

来源于骨髓的成人干细胞的移植已成功用于治疗人类疾病，诸如范康尼氏贫血(Fanconi′s Anemia)、再生障碍性贫血、急性及慢性白血病、脊髓增生性病症、骨髓发育不良症候群、淋巴增生性病症及其它恶性疾病。骨髓成人干细胞的替代性来源包括外周血液祖细胞、脐带血及自这些来源收集的间质干细胞。然而，存在与成人干细胞的治疗用途相关的若干缺点。已显示成人干细胞具有有限功效，诸如在培养中的若干继代后生长缓慢及多能性损失。