[发明专利]一种马铃薯茎尖剥离培育脱毒苗的方法

说明书

技术领域

 本发明涉及现代农业技术领域，具体的是涉及一种马铃薯茎尖剥离培育脱毒苗的方法。

背景技术

马铃薯是一种分布广泛，适应性强，产量高，营养价值丰富的宜粮、宜菜、宜饲、宜做工业原料等多种用途的粮食作物和经济作物，是我国继水稻、小麦、玉米、大豆之后的第五大粮食作物，是保障我国粮食安全的重要组成部分。我国现已成为世界马铃薯生产第一大国，到2010年，我国22个省区的马铃薯种植面积达到520万hm²，总产量达到8000多万吨。调查显示，2007年我国年人均消费马铃薯约32.5公斤，而英国、波兰、乌克兰、俄罗斯、白俄罗斯等国家年均消费在106.6公斤到188.8公斤之间，马铃薯加工可用于食品、造纸、纺织、制革、铸造、涂料、工业废水净化、农业、园艺、医疗、石油钻探及环卫等多个领域。马铃薯产品的加工具有较长的增值链条，是朝阳产业和贫困地区脱贫致富的支柱产业。因此，加快推进马铃薯产业发展，对保障国家粮食安全，促进农民增收具有很重要的意义。

目前，在马铃薯栽培过程中，出现马铃薯生长势衰退，植株矮化，茎秆细弱，叶片失绿、卷曲、皱缩或坏死，薯块变小或畸形，产量品种逐年下降，商品性状差，种植效益降低等情况，出现马铃薯的退化现象。马铃薯退化的原因是由于病毒侵染而引起退化。病毒侵入马铃薯植株后，即参与马铃薯的新陈代谢，利用马铃薯的营养复制增殖病毒，并通过马铃薯块茎无性繁殖逐代增殖积累，导致退化。病毒病在生产上极难防治，生产中采用多施肥料，合理灌溉，及时拔除病株，多喷农药防治蚜虫等方法只能起到减轻病害的作用，而不能从根本上达到治疗的目的。

解决马铃薯退化，减少病毒病危害的可行途径就是进行病毒脱除，生产脱毒马铃薯。我国脱毒马铃薯的种植面积占总生产面积不到20%，对脱毒马铃薯及脱毒种苗的需求较大。

发明内容

针对上述情况，本发明的目的是提供一种能有效增加马铃薯茎尖脱毒成活率及简易化操作的方法，进而生产马铃薯脱毒苗。

本发明一种马铃薯茎尖剥离培育脱毒苗的方法的技术方案如下：

（1）种芽的选择: 选取薯形良好无病害、虫害的健康薯块进行变温催芽，待马铃薯芽长到2～3cm时，切取下马铃薯芽尖芽茎段1～2cm，用自来水和洗涤剂冲洗30～60min，获得种芽；

（2）将获得的种芽用体积浓度75%的酒精浸泡1min，再用10wt%次氯酸钠溶液浸泡8～10min，用无菌水冲洗4～5次，将种芽定植于MS培养基上培养15～25d，至每个芽体长出1～3个小苗，获得脱毒苗；

（3）将获得的脱毒苗切段扩繁，至15～20d时，再将每株小苗带一片叶切段，每一小段在叶腋处挑去带有1～2片叶原基的分生组织，将分生组织放入MS培养基中培养25～30d，形成完整植株；

（4）对完整植株进行病毒检测，选出不带病毒的植株得到马铃薯脱毒苗。

优选的，所述各MS培养基的pH为5.8，各阶段MS培养基上培养的条件为培养条件为温度20～25℃，光照强度为2500-3000Lx，光照时间12h/d，本发明所述的变温催芽为常规变温催芽方法。

本发明的马铃薯茎尖剥离培育脱毒苗的方法，经过外植体先培养扩繁后进行茎尖剥离，可以由一个芽尖材料剥离出几十个茎尖分生组织，材料的成活率可以达到80%，并且可以减少由于外植体消毒不干净而引起的细菌或真菌污染，并且在叶腋下剥离芽尖分生组织要比直接在外植体芽尖上剥离茎尖分生组织的可操作性难度较低。而传统的芽尖培养脱毒材料的成活率在52%左右，且操作要求较高，材料较少时，由于冲洗不干净造成细菌或真菌污染而使稀少材料丢失。

具体实施方式

实施例1

本实施例是对“黑美人”马铃薯品种进行试验，具体的操作方法为：

种芽的选择:选择“黑美人”健康马铃薯块茎变温催芽，待芽长到2cm，用解剖刀从芽根部切下，放入250ml烧杯中用洗涤剂和自来水冲洗45min，获得种芽；

脱毒苗的获得：在无菌工作台内用体积浓度为75%的酒精浸泡1min，然后用10wt%次氯酸钠浸泡10min，用无菌水冲洗4次。然后将种芽用剪刀剪去根部端直接定植于pH为5.8的MS培养基上，培养条件为温度25℃，光照强度2800Lx，光照时间12h/d，放置于培养架上培养17d后，直到一个芽段长出1～3株小苗，获得脱毒苗；