[发明专利]转基因玉米Bt11液相芯片检测方法

权利要求书

1.用于检测转基因玉米Bt11的引物对和探针，其特征在于，

所述引物对为：

正向引物Bt11F：5’-TATCATCGACTTCCATGACCA-3’，

反向引物Bt11R：Biotin-5’-AGCCAGTTACCTTCGGAAAA-3’；

所述探针为：NH₂-C₁₂-5’-TGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAG-3’。

2.含有权利要求1所述引物对和探针的用于检测转基因玉米Bt11的试剂盒。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反应缓冲液中的一种或多种。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性验证探针：Biotin-5’-CTTTTCTACGGGGTCTGACGCTCA-3’。

6.一种转基因玉米Bt11液相芯片检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）提取待测玉米的总DNA；

2）以步骤1）中提取的DNA为模板，以权利要求1中所述的Bt11F和Bt11R为引物，进行PCR扩增反应；

3）将PCR产物与包被有权利要求1中所述探针的微球混合孵育，反应结束后，置于液相芯片检测仪上进行分析。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，PCR反应体系以50μL计为：

8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，PCR反应条件为：95℃预变性3min；95℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环；72℃延伸10min。

9.根据权利要求6-8任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤3）中所述微球为羧基化荧光磁性微球。

10.根据权利要求6-8任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤3）中混合孵育的条件为：95℃5min，58℃15min。