[发明专利]一种用于基因检测的质量型传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于基因检测的质量型传感器，包括质量型传感器本体，其特征在于，所述质量型传感器本体的非检测敏感位置表面设有聚乙二醇单分子层，所述质量型传感器本体的检测敏感位置表面设有巯基生物素单分子层，所述巯基生物素单分子层上嫁接有链亲和素层。

2.如权利要求1所述的一种用于基因检测的质量型传感器，其特征在于，质量型传感器本体的非检测敏感位置表面为二氧化硅表面，质量型传感器本体的敏感位置表面为镀金表面。

3.如权利要求1所述的一种用于基因检测的质量型传感器，其特征在于，巯基生物素单分子层选自Sulfo-NHS-SS-Biotin、NHS-SS-Biotin或Sulfo-NHS-(PEG4-bismannose)-SS-biotin。

4.如权利要求1所述的一种用于基因检测的质量型传感器，其特征在于，所述聚乙二醇单分子层为自组装的聚乙二醇单分子层，所述巯基生物素单分子层为自组装的巯基生物素单分子层。

5.如权利要求1所述的一种用于基因检测的质量型传感器，其特征在于，所述质量型传感器的表面使用BSA封闭。

6.如权利要求1-5任一权利要求所述的一种用于基因检测的质量型传感器，其特征在于，所述的质量型传感器为微悬臂梁传感器或石英晶体微天平。

7.如权利要求1-6任一权利要求所述的一种用于基因检测的质量型传感器的制备方法，包括如下步骤：

（a）在质量型传感器的非敏感位置表面自组装聚乙二醇单分子层；

（b）在质量型传感器的检测敏感位置表面自组装巯基生物素单分子层；

（c）在步骤b所得的巯基生物素单分子层上嫁接链亲和素；

（d）使用BSA封闭质量型传感器表面非特异性位点。

8.如权利要求7所述的质量型传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤a中聚乙二醇单分子层的自组装方法是将质量型传感器静置在聚乙二醇硅烷溶液中自组装生成聚乙二醇单分子层。

9.如权利要求8所述的质量型传感器的制备方法，其特征在于，所述的聚乙二醇硅烷溶液包括聚乙二醇硅烷、无水乙醇和去离子水，所述聚乙二醇硅烷、无水乙醇和去离子水的体积比为1:100:1，浸泡温度为60-80℃，浸泡时间为60-120分钟。

10.如权利要求7所述的质量型传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤b中，自组装巯基生物素单分子层的具体方法是将质量型传感器静置在巯基生物素溶液中生成生物素单分子层。

11.如权利要求10所述的质量型传感器的制备方法，其特征在于，所述巯基生物素溶液选自含Sulfo-NHS-SS-Biotin的PBS缓冲液、含NHS-SS-Biotin的PBS缓冲液或含Sulfo-NHS-(PEG4-bismannose)-SS-biotin的PBS缓冲液中的一种，浓度为0.1～2.5mM，所述质量型传感器在巯基生物素溶液中静置的时间为8小时以上。

12.如权利要求11所述的质量型传感器的制备方法，其特征在于，所述巯基生物素溶液为1mM Sulfo-NHS-SS-Biotin的PBS缓冲液，静置温度为0-20℃。

13.如权利要求7所述的质量型传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤c中嫁接链亲和素的具体方法为：将自组装巯基生物素后的质量型传感器放在1～2.5wt%链亲和素的PBS缓冲液中室温孵育0.5小时以上。

14.如权利要求7所述的质量型传感器的制备方法，其特征在于，步骤d所述封闭非特异性位点的具体方法为：将嫁接链亲和素后的质量型传感器放在1～5wt%BSA的PBS缓冲液中室温孵育0.5小时以上。

15.如权利要求1-6任一权利要求所述的质量型传感器在基因分析用传感器制造领域中应用。

16.一种试剂盒，包括如权利要求1-6任一权利要求所述的质量型传感器、目标DNA上游引物、目标DNA下游引物及限制性内切酶，所述上游引物或下游引物上偶联有生物素。

17.如权利要求16所述的一种试剂盒，其特征在于，还包括PCR试剂。