[发明专利]一种香菇闵丰1号菌种的SSR标记指纹图谱与应用

说明书

技术领域

本发明属于香菇菌种的检测领域，特别涉及一种香菇闵丰1号菌种的SSR标记指纹图谱与应用。

背景技术

我国香菇产量已从1983年的1.95万吨迅速发展到2005年的242万吨，占全球香菇总产量的70%以上，改写了世界食用菌产量的排行榜，并不断缩小与排行第一的双孢蘑菇产量差距，有专家预测，由于中国香菇产业的迅猛发展，在近10年内其将成为世界产量最高的食用菌。中国香菇以其惊人的发展速度，优质的品质及低廉的成本为世界菇业人士瞩目，中国香菇已风靡世界。

优质菌种在香菇单产和质量中的贡献率举足轻重，这决定了香菇菌种在香菇产业中的重要地位。1999年我国签署了《国际植物新品种保护法》，这不仅要求我们尊重其它国家的品种知识产权，同时也要加强保护我们国家自己的品种知识产权，为了建立食用菌新品种登记制度来真正保护我国的品种产权，必须首先建立成熟的品种鉴定技术，为新品种登记奠定基础。尤其日本2004年4月1日开始实行《种苗法修正案》，对我国食用菌尤其是香菇的出口构成了极大的威胁。就国内而言，香菇栽培菌种“同种异名，异种同名”的现象，不仅给菇农带来了极大的损失，影响了他们的栽培积极性，也极大地影响了中国香菇的快速发展；而且，随着大规模的工厂化栽培方式的出现，对香菇栽培菌株质量的要求越来越高，需要发展更为简便、快速、准确的菌株鉴定技术，以保证每批次的用种都准确无误。

面对这种局势，就需要我们进一步加快菌种鉴定技术的研究，在香菇的研究中引进更为有效的菌种鉴定体系。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种香菇闵丰1号菌种的SSR标记指纹图谱及其构建方法与应用，该指纹图谱与常规形态学检测、拮抗试验、出菇试验相比，具有检测时间短，准确性高，重复性好的优点。

本发明的一种香菇闵丰1号菌种的SSR标记指纹图谱，该指纹图谱由7对SSR标记组成，是基于香菇基因组简单重复序列片段开发SSR引物，扩增带型好，重复性高的SSR引物，标记详细信息如表1。

表1SSR标记详细信息列表

本发明的一种香菇闵丰1号菌种的SSR标记指纹图谱的应用，是利用香菇基因组简单重复序列片段开发的7对SSR引物，通过对收集的25份国审香菇栽培品种的SSR引物带型扩增，本发明确定了7对SSR引物在香菇闵丰1号菌种中扩增出的等位片段的数量并编号（表2），通过不同SSR等位片段的编号组合可有效识别闵丰1号菌种（图2-8）。通过对照50bp DNAladder可确定各SSR引物扩增的等位片段的相对分子量，存在闵丰1号菌种特异SSR等位片段组合的菌种，即是香菇闵丰1号菌种，该菌种的编号组合为：（1+2）（1+4）（1+2）2122。

表2SSR引物扩增的等位片段信息汇总表

有益效果

本发明与常规形态学检测、拮抗试验、出菇试验相比，具有检测时间短，准确性高，重复性好的优点。检测所需时间只需要3~4天，而常规的拮抗试验所需时间至少需要两周时间，出菇试验则需要至少3个月的时间；该方法在所收集的我国25个通过国审的香菇主栽菌种中具有闵丰1号菌种的专一性，具有良好的应用前景。

附图说明

图1为香菇闵丰1号菌种SSR标记指纹图谱，其中M是50bp DNA ladder，数字代表的是所用的7对SSR引物，NC是空白对照，箭头所指的是香菇闵丰1号菌种的特异性SSR等位片段组合；

图2为引物Le_fp0001在所选国审香菇栽培材料中的扩增图谱；

图3为引物Le_fp0002在所选国审香菇栽培材料中的扩增图谱；

图4为引物Le_fp0003在所选国审香菇栽培材料中的扩增图谱；

图5为引物Le_fp0004在所选国审香菇栽培材料中的扩增图谱；

图6为引物Le_fp0005在所选国审香菇栽培材料中的扩增图谱；

图7为引物Le_fp0006在所选国审香菇栽培材料中的扩增图谱；

图8为引物Le_fp0007在所选国审香菇栽培材料中的扩增图谱。

具体实施方式