[发明专利]酶催化活化废次烟草提取茄尼醇的方法

权利要求书

1.一种酶催化活化废次烟草提取茄尼醇的方法，其特征在于所述方法的具体步骤如下：

(1)原料预处理

以烟草固体废弃物为原料，先将原料用水清洗干净后，放置于烘箱中，先在85～110℃的烘箱中烘30～90min，再经粉碎机粉碎后、并过20～160目筛，未过筛的原料返回粉碎机中再粉碎，收集过筛原料，即为预处理后的烟草固体废弃物；

(2)酶解反应

第(1)步骤完成后，先按照第(1)步处理后的烟草固体废弃物的质量∶酶的质量∶水的体积之比为1g∶0.1～0.6g∶1～15ml的比例，在第(1)步预处理后的原料中，加入酶及水，搅拌均匀后，再用硫酸或氢氧化钠溶液调节体系的pH值为4～9，然后将调节pH值后的混合液放置于摇床中，在水浴温度为25～60℃下进行酶解活化2～14h，用抽滤泵进行抽滤，分别收集抽滤液和抽滤渣，所述的酶为纤维素酶或木质素酶或纤维素酶和木质素酶复配酶，所述的复配酶为木质素酶∶纤维素酶的质量比为1∶1～6；

(3)超声波处理

第(2)步骤完成后，先将第(2)步收集的抽滤渣，转入到浸提容器中，再按照第(1)步骤预处理后的烟草固体废弃物的质量∶复合萃取剂溶液的体积之比为1g∶8～12ml的比例，在浸提容器中加入复合萃取剂溶液，搅拌混合均匀，并在超声波的功率为40～200W、温度为30～55℃条件下进行超声波处理5～40min后，用抽滤机进行抽滤，分别收集抽滤液和抽滤渣，将收集的抽滤液转入离心机中，在离心转速为3000～4000r/min条件下，进行离心分离5～15min，分别收集离心清液和离心渣，所述的复合萃取剂溶液为乙醇∶甲醇的质量浓度比为1∶4～9的乙醇和甲醇的混合溶液；

(4)茄尼醇产品制备

第(3)步骤完成后，先将第(3)步收集的离心清液通过高效液相色谱法测定茄尼醇的浓度，再将第(3)步收集的离心清液第一次放置于在旋转蒸发器中，在真空压力为0.1～0.6Mpa、温度为30～60℃下，进行第一次减压浓缩至粘稠状，就制得茄尼醇粗制品，然后，按照制得的茄尼醇粗制品的质量∶所述的复合萃取剂溶液的体积之比为1g∶3～6ml的比例，在浸提容器中加入制得的茄尼醇粗品和所述的复合萃取剂溶液，混合溶解均匀，第二次通过旋转蒸发器，在真空压力为0.1～0.6Mpa、温度为30～60℃下，进行第二次减压浓缩，并如此重复1～3次，制得茄尼醇产品；

(5)副产物烟碱的提取

第(4)步骤完成后，先将第(2)步收集的抽滤液转入到浸提容器中，再按第(1)步预处理后的烟草固体废弃物的质量∶有机萃取剂的体积之比为1g∶5～10ml的比例，在浸提容器中加入有机萃取剂，搅拌混合均匀后，进行萃取，并静止10～30min，分别收集上层水相及下层有机萃取相，将收集的下层有机萃取相放置于旋转蒸发器中，在真空压力为0.1～0.6Mpa、温度为30～60℃下，进行减压浓缩至粘稠状，就制得烟碱粗品副产品，所述的有机萃取剂为乙醚或乙酸乙酯。

2.根据权利要求1所述的酶催化活化废次烟草提取茄尼醇方法，其特征在于：

第(1)步中，烘箱的温度为100℃，烘干时间为60min，废弃烟叶过60目筛；

第(2)步中，按照第(1)步预处理后的烟草固体废弃物原料的质量∶酶的质量∶水的体积比为1g∶0.4g∶5ml，用硫酸调节体系的pH值为6，在摇床水浴温度为40℃条件下，进行酶解活化8h，所述的酶为纤维素酶和木质素酶的复配酶，所述复配酶为木质素酶∶纤维素酶的质量比为1∶5；

第(3)步中，第(1)步预处理后的烟草固体废弃物的质量∶复合萃取剂溶液体积比为1g∶10ml，复合萃取剂乙醇∶甲醇的体积比例为1∶6，超声波功率为100W，超声温度为50℃，超声时间为25min；离心转数为3500r/min，离心时间为10min；

第(4)步中，第一、二次进行减压浓缩的真空压力为0.2Mpa、浓缩温度为45℃，第二次减压浓缩所按照制得的茄尼醇粗制品的质量∶所述的复合萃取剂溶液的体积之比为1g∶5ml的比例加入复合萃取剂溶液，并如此重复2次；

第(5)步中，第(1)步预处理后的烟草固体废弃物的质量∶有机萃取剂的体积之比为1g∶8ml，静置时间为20min，真空压力为0.2Mpa、浓缩温度为45℃，所述的有机萃取剂为乙酸乙酯。