[发明专利]一种鉴别肺癌亚型的microRNA标志物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及肺癌亚型的诊断，具体地说，涉及鉴别肺癌亚型的microRNA标志物及该microRNA的应用。

背景技术

肺癌已成为目前世界上病死率第一位的恶性肿瘤，2011年世界卫生组织最新资料显示，2008年全球约有160万肺癌新患者，约有140万肺癌患者死亡。在肺癌患者中，小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）约占15%，非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）约占80%，NSCLC主要包括腺癌（adenocarcinoma lung cancer，AC）及鳞癌（squamous cell lung cancer，SQ）两大类型。肺癌是预后最差的恶性肿瘤之一，即便早期（pIa-pIb）肺癌经手术及放化疗治疗后的5年复发率仍然高达40%，而大部分患者（约75%）就诊时已处于中晚期，已失去了外科手术及多学科根治的最佳时机，极易复发及远处转移，I-IV期患者总体5年生存率仅约10%。造成这种状况的主要原因是缺乏有效的肺癌早期诊断及早期治疗的方法。

肺癌治疗已进入个体化时代，不同亚型、不同分期的肺癌治疗方案不同。SCLC早期即发生血行转移，首选治疗方案为全身化疗联合放疗，而非手术切除。根治性手术是SQ及AC的首选治疗方法，辅助以放化疗。分子靶向治疗被认为是特异性最高的肺癌个体化治疗手段，如表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）络氨酸激酶抑制剂仅对EGFR突变的肺腺癌患者有效，SQ对培美曲赛治疗效果不如AC，用贝伐单抗治疗可引起致命的大出血。因此，准确的肺癌病理分型对肺癌患者靶向治疗方案的选择至关重要，研究肺癌肿瘤标志物，并准确的对肺癌进行分子分型，进而正确指导靶向治疗显得尤为迫切，并将会带来巨大的社会效益及经济效益。

microRNA（miRNA）是一类小的内源性非编码RNA分子，大小为20-25个核苷酸（nt），这些小的microRNA通常靶向一个或者多个mRNA，通过翻译水平的抑制或断裂靶标mRNAs而调节基因的表达。它们大约在10年前被发现，已被认为在细胞发育、分化、增殖和凋亡中发挥重要作用（Bartel, D.P. (2004) Cell 116, 281-297, Ambros, V. (2004) Nature 431, 350-355；He, L. et al. (2004) Nat Rev Genet 5, 522-531）。microRNA比mRNA在作为肿瘤生物标志物方面具有更大的优势，因为它们在体外非常稳定（Lu, J. et al., (2005) Nature 435, 834-838; Lim, L.P. et al., (2005) Nature 433, 769-773）。

microRNA是从初级转录物（pri-microRNA）产生的，pri-microRNA被RNase III Drosha加工为含茎-环结构的前体microRNA（pre-microRNA）。接着，在Dicer（一种RNase III）的作用下，发夹状的pre-microRNA在细胞质中进一步被切割产生成熟的microRNA，这些成熟的microRNA与其他蛋白质一起组成microRNA-蛋白质复合体（miRNP）。microRNA引导miRNP到达它们的靶mRNA，在此它们发挥各自的功能（参见综述例如Bartel, D.P. (2004) Cell 23, 281-292；He, L. and Hannon, G.J. (2004) Nat. Rev. Genet. 5, 522-531）。

根据microRNA与其靶mRNA之间的互补性程度，microRNA可以指导不同的调节过程。那些与microRNA高度互补的靶mRNA通过与RNA干扰（RNAi）相同的机制被特异降解。因此，在这种情况下，microRNA是担当小干扰RNA（siRNA）的角色；与microRNA互补性较低的靶mRNA被引导进入细胞降解途径，或者在蛋白质翻译上平上被阻遏而mRNA水平不受影响。