[发明专利]解淀粉芽孢杆菌Ba168及其发酵培养方法和应用

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌Ba168，CGMCC No.6462，该解淀粉芽孢杆菌Ba168的16SrDNA如序列表1所示。

2.解淀粉芽孢杆菌Ba168的发酵方法，其特征在于：所述发酵方法是以权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌Ba168为原料，包括下述步骤：

(1)、菌种活化：将解淀粉芽孢杆菌Ba168菌种接种到LB试管斜面上面，于30℃活化培养48h，所述LB培养基配方为酵母浸膏5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂15～20g，水1000ml，pH 7.4～7.6，连续转接3代，确保菌株纯度后，再接种到种子液中使用。

(2)、种子液的制备：从斜面上挑取菌接种到装有LB培养基的三角瓶中，于恒温振荡培养箱中振荡培养，即得到种子液，所述的LB培养基配方为：蛋白胨10g，NaCl 10g，水1L，酵母浸膏5g，pH7.0；

(3)、发酵培养：将种子液先后进行种子罐发酵培养和大规模工业发酵培养，得到发酵液；其中种子罐发酵培养和大规模工业发酵培养步骤如下：

种子罐发酵培养：FJ液体培养基，装料系数0.7，培养条件：26～28℃，48h，接种量：9%，通气量：2.5L/min，搅拌转速：200r/min；

大规模工业发酵培养：FJ液体培养基（20~36T），装料系数0.7，培养条件：26～28℃，60~70h，接种量：9%，通气量：2.0L/min，搅拌转速：150r/min；

所述的FJ液体培养基配方为：黄豆饼粉2%，葡萄糖1%，淀粉1.5%，CaCO₃0.25%，K₂HPO₄ 0.05%，MgSO₄·7H₂O 0.25%，FeSO₄·7H₂O 0.25%，其余为水，所列百分比为质量分数。

3.由权利要求2所述的解淀粉芽孢杆菌Ba168发酵方法制备所得的发酵液。

4.解淀粉芽孢杆菌Ba168杀菌剂的制备方法，其特征在于：所述制备方法是以由权利要求3所述的解淀粉芽孢杆菌Ba168发酵液为原料，包括下述步骤：

(1)、过滤浓缩发酵液：用草酸调节pH至4.5~5.0后，将发酵液通过截留分子量40000～100000k的无机陶瓷超滤膜过滤分离，操作温度为25~45℃，膜通量为50~60LMH，被截留在膜的进液侧的溶液为芽孢溶液，芽孢溶液浓缩倍数为6-7倍；

(2)、喷雾干燥：向浓缩后的发酵液中添加发酵液质量1.0%的白炭黑、微细滑石粉、轻质碳酸钙或2500目超细重钙填料；再将芽孢溶液经喷雾制成粉末，即得到解淀粉芽孢杆菌Ba168杀菌剂，其中喷雾干燥的进口温度为170~190℃，出口温度为65~85℃，进料速度60mL/min，喷头压力0.10MPa。

5.解淀粉芽孢杆菌Ba168杀菌剂，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌Ba168杀菌剂由权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌Ba168发酵制备所得。

6.解淀粉芽孢杆菌Ba168杀菌剂，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌Ba168是以由权利要求3所述的解淀粉芽孢杆菌Ba168发酵液为原料，通过下述方法制备所得：

(1)、过滤浓缩发酵液：用草酸调节pH至4.5~5.0后，将发酵液通过截留分子量40000~100000k的无机陶瓷超滤膜过滤分离，操作温度为25~45℃，膜通量为50~60LMH，被截留在膜的进液侧的溶液为芽孢溶液，芽孢溶液浓缩倍数为6-7倍；

(2)、喷雾干燥：向浓缩后的发酵液中添加发酵液质量1.0%的白炭黑、微细滑石粉、轻质碳酸钙或2500目超细重钙填料；再将芽孢溶液经喷雾制成粉末，即得到解淀粉芽孢杆菌Ba168杀菌剂，其中喷雾干燥的进口温度为170~190℃，出口温度为65~85℃，进料速度60mL/min，喷头压力0.10MPa。

7.权利要求1所述一种解淀粉芽孢杆菌Ba168、权利要求3所述的发酵液以及权利要求6所述的解淀粉芽孢杆菌Ba168杀菌剂在制备防治由尖孢镰刀菌属引起的作物根腐病药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述由尖孢镰刀菌属引起的作物根腐病为白术根腐病、西洋参根腐病和三七根腐病。