[发明专利]一种溪黄草素A的制备工艺

说明书

技术领域

本发明属于天然药物提取技术领域，涉及一种溪黄草素A的制备工艺。

背景技术

溪黄草素A（Rabdoserrin A），分子式：C₂₀H₃₀O₆，分子量：366.45，是一种二萜类化合物，为棱晶(丙酮)，mp278～280℃。现代药理研究表明，溪黄草素A具有具有抗癌活性，对人宫颈癌（HeLa)细胞有显著的抑制作用。溪黄草素A来源于唇形科（Labiatae）溪黄草Rabdosia serra(Maxim.)Hara的全草。

溪黄草具有清热解毒、利湿退黄、散瘀消肿的功效，用于湿热黄疽、胆囊炎、泄泻、疮肿、跌打伤痛等症，为多年生草本，广泛分布于分布于东北及山西、陕西、甘肃、江苏等地，资源丰富，溪黄草中含二萜类化合物：溪黄草素（rabdoserrin)A，以及尾叶香茶菜素（excisanin)A，2α-羟基熊果酸（2α-hydroxyl-ursolic acid)，熊果酸（ursolic acid)，β-谷甾醇（β-sitosterol)和β-谷甾醇甙（β-sitosterol glucoside)。溪黄草素A具有较好的临床应用价值，可作为一种有前途的抗肿瘤药物，值得进一步深入研究与开发。

目前，国内尚无溪黄草素A的制备工艺报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种大量制备高纯度溪黄草素A的工艺。

为了解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

一种溪黄草素A的制备工艺，其特征在于：以溪黄草为原料，粉碎，以乙醇溶液为提取溶媒进行提取，将合并的提取液冷却后过滤，滤液加活性炭搅拌，保温脱色30min，过滤，脱色液浓缩至相对密度为1.05-1.12，再通过3000-6000道尔顿的中空纤维超滤膜，操作压力为0.1-0.2MPa，透过液经预处理好的大孔吸附树脂吸附，先用水洗脱，再以50-70%乙醇水溶液洗脱，洗脱用量为3-6BV，洗脱液浓缩干燥得到粗品，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，收集流分减压浓缩，冷冻干燥即得溪黄草素A。

所述乙醇溶液的浓度为60-80%，提取方法为回流提取、渗漉提取、微波提取中的一种。

所述活性炭为药用活性炭，加入量为药材量的2-5%，脱色温度为40-60℃。

所述溶剂系统体积比为（5-7）：（2-4）：（5-7）：（2-4）。

本发明方法制备溪黄草素A，具有能耗低，绿色环保，且所用试剂可重复使用，制备量大，产品无损失，纯度高等优点。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

以溪黄草为原料，粉碎，取1kg置于提取罐中，加入6倍量的70%乙醇进行加热回流提取2小时，提取2次，合并两次提取液放冷，过滤，滤液加2%的药用活性炭加热搅拌，60℃下保温脱色30min，过滤，脱色过滤液浓缩至相对密度为1.08，再通过截留分子量为6000道尔顿的中空纤维超滤膜系统中，调整操作压力为0.2MPa，收集透过液，将透过液上样于预处理好的大孔吸附树脂柱，饱和吸附后，依次用水、5BV60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，旋转蒸发浓缩，干燥即得溪黄草素A粗品。以体积比7:3:7:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，取上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取下相溶解粗品，注入色谱仪，调节转速为850rpm，流速2ml/min，收集溪黄草素A流分，减压浓缩，冷冻干燥得溪黄草素A129mg，经HPLC检测，其含量为98.8%。

实施例2：