[发明专利]一种从鹿衔草中分离水晶兰苷单体的方法

权利要求书

1.一种从鹿衔草中分离水晶兰苷单体的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）备料：将干燥后的鹿衔草粉碎为2～5mm的段；

（2）回流提取：用极性溶剂对粉碎的鹿衔草进行回流提取，鹿衔草质量与极性溶剂体积的比例为1:（10～30），单位分别是千克和升，提取温度为40℃～80℃，提取时间为5～10h；

（3）富集：取步骤（2）获得的浓缩液，上AB-8大孔树脂进行一次吸附，吸附完全后依次用水、浓度为20～40%的乙醇溶液、浓度为80～95%的乙醇溶液解析，收集浓度为20～40%的乙醇解析液，浓缩至无醇，然后再次吸附，吸附完全后用浓度为70～90%的乙醇溶液解析，收集解析液，于40～60℃浓缩至浸膏，然后用60-80目硅胶拌样，干燥成分散的颗粒状原料，备用；

（4）分离：将200-300目硅胶置于体积比为25:1～15:1的乙酸乙酯-甲醇溶液中湿法装柱，分离柱直径为10～30cm，用体积比为25:1～15:1的乙酸乙酯-甲醇溶液平衡分离柱，平衡好后，按质量比为原料:硅胶=1:（2～4）的比例上步骤（3）得到的颗粒状原料，然后用体积比为20:1～5:1的乙酸乙酯-甲醇溶液梯度洗脱，乙酸乙酯-甲醇溶液中加入三聚磷酸钠固体，乙酸乙酯-甲醇溶液体积与三聚磷酸钠固体质量的比例为1:（0.5～2），单位分别是升和克，收集洗脱液为目标产品溶液，即得到水晶兰苷的粗溶液，于40℃～60℃减压回收试剂，得到水晶兰苷粗品；

（5）脱盐干燥：将步骤（4）所得的水晶兰苷粗品用水溶解，上活化好的MCI填料分离柱，先用水洗脱，水洗液丢弃，然后用浓度为60～80%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，于40～60℃减压浓缩至干，然后真空常压干燥或冷冻干燥，得到水晶兰苷单体。

2.根据权利要求1所述的从鹿衔草中分离水晶兰苷单体的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，鹿衔草为鹿衔草的叶和茎中的一种或两种；所述步骤（2）中，鹿衔草质量与极性溶剂体积的比例为1:20，单位分别是千克和升；极性溶剂为浓度为60%～80%的乙醇溶液；提取温度为60℃，提取时间为6h；所述步骤（3）中，一次吸附中，吸附完全后依次用水、浓度为30%的乙醇溶液、浓度为90%的乙醇溶液解析；再次吸附中，吸附完全后用浓度为80%的乙醇溶液解析，收集解析液，于50℃浓缩至浸膏，然后用60-80目硅胶拌样；所述步骤（4）中，将200-300目硅胶置于体积比为20:1的乙酸乙酯-甲醇溶液中湿法装柱，分离柱直径为20cm，用体积比为20:1的乙酸乙酯-甲醇溶液平衡分离柱；原料:硅胶=1:3；用体积比为15:1～5:1的乙酸乙酯-甲醇溶液梯度洗脱；乙酸乙酯-甲醇溶液体积与三聚磷酸钠固体质量的比例为1:1，单位分别是升和克；收集体积比为10:1的乙酸乙酯-甲醇溶液洗脱下来的溶液为目标产品溶液；于50℃减压回收试剂；所述步骤（5）中，用浓度为70%的乙醇溶液洗脱；于50℃减压浓缩至干。

3.根据权利要求2所述的从鹿衔草中分离水晶兰苷单体的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，极性溶剂为浓度为70%的乙醇溶液。

4.根据权利要求1或2所述的从鹿衔草中分离水晶兰苷单体的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，回流提取分三次进行，合并三次的提取液为最终提取液。