[发明专利]一种提取秤星树酸甲的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学技术领域，涉及一种一种提取秤星树酸甲的方法。

背景技术

秤星树酸甲（Asprellic acid A），分子式为C₄₈H₆₀O₈，分子量为765，无色针晶，mp.250-252℃。是从冬青科植物秤星树Ilex asprella(Hook.& Arn.)Champ.ex Benth.叶中分离得到一种三萜类化合物。药理研究表明，秤星树酸甲具有细胞毒活性，对恶性黑素瘤RPMI-7951的ED₅₀为0.62μg/ml，对KB细胞的ED₅₀为3.75μg/ml。

现有技术中，尚未见制备秤星树酸甲的生产工艺报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取秤星树酸甲的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

（1）将秤星树叶粉碎成粗粉，投入萃取釜中进行超临界流体萃取，向萃取罐内泵入CO₂和夹带剂，萃取压力为28-45MPa，萃取温度为35-55℃，提取时间1-3h，解析压力为6-8MPa，解析温度为30-40℃，收集萃取物；

（2）将所得萃取物用乙醇溶解，干法上样至高压硅胶柱层析纯化，二氯甲烷-丙酮溶剂系统梯度洗脱，收集秤星树酸甲流分，减压浓缩，冷却析晶，得粗晶；

（3）将粗晶用乙酸乙酯-乙醇重结晶得到秤星树酸甲。

所述步骤（1）中夹带剂为85-95%乙醇溶液。

所述步骤（2）中所述高压硅胶柱层析，硅胶目数为200-300目，柱压为3-5MPa，柱内径为50-200mm，层析柱径高比为1：7-18。

所述步骤（2）中所述二氯甲烷-丙酮的体积比为13-2:3。

所述步骤（3）中所述乙酸乙酯-乙醇的体积比为9:1-2。

本发明的有益效果是：本发明工艺步骤少，耗时短，得率高，易规模化生产；采用高压层析柱，上样量大，生产周期短，分离度好，产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

称取秤星树叶1000g粉碎成粗粉，投入到超临界萃取釜中，以CO₂为溶剂，85%的乙醇溶液为夹带剂，设定萃取柱温度为35℃、压力为28MPa，分离器的温度为30℃、压力为6MPa，CO₂流量为18L/h，萃取时间为1h，收集萃取物。称取经活化的200-300目的硅胶装入不锈钢层析柱中（内径100mm，径高比为1:12），将所得萃取物用乙醇溶解，干法上样至高压硅胶柱，用二氯甲烷-丙酮按体积比13:3、5:3、2:3梯度洗脱，收集秤星树酸甲流分，减压浓缩，冷却析晶，过滤得粗晶，再用体积比为9:2的二氯甲烷-甲醇重结晶，滤出晶体，干燥得成品，秤星树酸甲含量为90.9%。

实施例2：

称取秤星树叶1000g粉碎成粗粉，投入到超临界萃取釜中，以CO₂为溶剂，85%的乙醇溶液为夹带剂，设定萃取柱温度为42℃、压力为37MPa，分离器的温度为38℃、压力为6MPa，CO₂流量为20L/h，萃取时间为3h，收集萃取物。称取经活化的200-300目的硅胶装入不锈钢层析柱中（内径50mm，径高比为1:7），将所得萃取物用乙醇溶解，干法上样至高压硅胶柱，用二氯甲烷-丙酮体积比13:3、6:3、2:3梯度洗脱，收集秤星树酸甲流分，减压浓缩，冷却析晶，过滤得粗晶，再用体积比为9:1的二氯甲烷-甲醇重结晶，滤出晶体，干燥得成品，秤星树酸甲含量为91.8%。

实施例3：

称取秤星树叶2000g粉碎成粗粉，投入到超临界萃取釜中，以CO₂为溶剂，90%的乙醇溶液为夹带剂，设定萃取柱温度为55℃、压力为45MPa，分离器的温度为40℃、压力为8MPa，CO₂流量为22L/h，萃取时间为2.5h，收集萃取物。称取经活化的200-300目的硅胶装入不锈钢层析柱中（内径150mm，径高比为1:18），将所得萃取物用乙醇溶解，干法上样至高压硅胶柱，用二氯甲烷-丙酮体积比13:3、6:3、2:3梯度洗脱，收集秤星树酸甲流分，减压浓缩，冷却析晶，过滤得粗晶，再用体积比为9:2的二氯甲烷-甲醇重结晶，滤出晶体，干燥得成品，秤星树酸甲含量为91.3%。

实施例4：

称取秤星树叶5000g粉碎成粗粉，投入到超临界萃取釜中，以CO₂为溶剂，95%的乙醇溶液为夹带剂，设定萃取柱温度为48℃、压力为40MPa，分离器的温度为40℃、压力为7MPa，CO₂流量为15L/h，萃取时间为1.5h，收集萃取物。称取经活化的200-300目的硅胶装入不锈钢层析柱中（内径200mm，径高比为1:15），将所得萃取物用乙醇溶解，干法上样至高压硅胶柱，用二氯甲烷-丙酮体积比13:3、7:3、3:3梯度洗脱，收集秤星树酸甲流分，减压浓缩，冷却析晶，过滤得粗晶，再用体积比为9:1.5的二氯甲烷-甲醇重结晶，滤出晶体，干燥得成品，秤星树酸甲含量为93.5%。