[发明专利]具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物学领域，具体地说，涉及一种具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27及其应用。 

背景技术

抗生素自20世纪50年代以来广泛应用于畜禽养殖业，在促进动物生长，保证动物健康，节约饲料成本，提高经济效益等方面做出了巨大贡献。由于抗生素在动物养殖业中的长期使用，近些年来，由其所致的毒副作用和药物残留问题已引起人们的关注。2006年，欧盟已经全面禁止了饲料中抗生素的使用，美国和日本等国家也对其做出了严格的限制。2011年，韩国全国禁止在动物饲料中添加抗生素。随着人们对畜产品安全和环境保护意识的不断加强，益生菌作为抗生素的替代品倍受关注，越来越多的应用于动物营养和饲料中。益生菌是一类能改善动物胃肠道微生态平衡，有益于动物健康和生产性能发挥的微生物添加剂。其主要作用效果体现在改善动物新陈代谢，提高营养物质吸收和利用，提高免疫力，减少环境污染等方面发挥重要作用。 

由于芽孢杆菌对干燥、高温、高压、氧化等不良环境抵抗力很强，这种稳定性增加了它作为益生菌的潜力。因此，获得新型具有益生特性的芽孢杆菌的研究具有重大意义。分离和筛选抗病原菌且具有益生效果的枯草芽孢杆菌，可以更好的应用于饲料添加剂，以代替抗生素。 

发明内容

本发明的目的是提供一种具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27及其应用。 

为了实现本发明的目的，本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B27，是从北京市大兴养猪场附近土壤中筛选到的一株芽孢杆菌。经 16S rRNA基因序列分析和体外益生效果评价，该菌株为能够抑制病原菌且具有益生效果的枯草芽孢杆菌，其16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示。该菌株现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCC NO.6538，保藏日期2012年9月7日。 

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B27的微生物学特性为：革兰氏阳性菌，无荚膜。菌体表明粗糙，在液体培养基中生长时形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉。 

本发明还提供含有该具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27的菌剂。 

本发明还提供所述具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27或上述菌剂在广谱抗菌中的应用。其中，具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27的抑菌谱包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌；所述革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌，如Staphylococcus aureus IVDC C56005（中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心）；所述革兰氏阴性菌为致病性大肠杆菌，如K88（Escherichia coli IVDC C83901），鼠伤寒沙门氏菌，如Salmonella typhimurium IVDC C79-13（中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心）。 

本发明还提供所述具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27在制备动物饲料添加剂中的应用。 

本发明还提供一种含有该具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27的动物饲料添加剂。 

本发明还提供一种含有该具有益生作用的枯草芽孢杆菌B27的动物饲料。其中，所述动物饲料中枯草芽孢杆菌B27的活菌数为1.0×10⁸~3.0×10⁸CFU/g基础日粮，优选2.0×10⁸CFU/g基础日粮。 

本发明通过体外法鉴定了枯草芽孢杆菌B27的益生效果，结果表明，枯草芽孢杆菌B27能够耐酸、酸胆盐，能抵抗胃肠道的内环境，具备益生菌的潜力。 

本发明还提供了一种体外法鉴定菌株耐酸、耐胆盐和模拟胃肠道 环境中生长的益生潜力，包括以下步骤： 

1)配制不同pH值的培养基，检测枯草芽孢杆菌B27的生长情况； 

2)配制不同胆盐浓度的培养基，检测枯草芽孢杆菌B27的生长情况； 

3)模拟人工胃肠液，检测枯草芽孢杆菌B27的生长情况。 

本发明进一步验证了枯草芽孢杆菌B27在断奶仔猪饲料添加中的应用效果。