[发明专利]食用菌无菌消化物培养基

说明书

技术领域   本发明涉及一种食用菌无菌消化物培养基的配方及其制备方法。其主要成分是胰蛋白胨、大豆酪蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钠、葡萄糖、酵母粉制备而成；用于鲍鱼菇、 秀珍菇、 食用真菌菇、 菇笋、 金福菇、 猪肚菇等食用真菌的替代培养。食用菌无菌消化物培养基是人工配制的适合食用菌生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种食用菌或积累代谢产物。就营养物质而言，一般不外乎碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等几大类。在配制试剂时，根据各类食用菌的特点，就可以配制出适合不同种类食用菌生长发育所需要的培养基。培养基除了满足食用菌所必需营养物质外，还要求有一定的酸碱度和渗透压。各类食用菌对营养的要求不尽相同，因培养基的种类繁多。培养基的制备程序方法，可因其种类不同而各异，即使同一种配方的培养基，配制时的投料，应按时先写好的配方所列次序逐一称取，投入已加入少量蒸馏水的适当容器中。振摇溶解，再文火缓缓加热并不断搅拌，以防焦化。各类食用菌正常生长发育的最适pH范围差异较大，所以，配制和使用培养基时，对其pH的调节和测定极为重要。培养基的pH值受多种因素影响，如加热、高压灭菌、温度变化、缓冲容量等，培养基一旦配制有误，整亩的食用菌都会死亡或出现病状，会造成巨大的经济损失。食用菌工作者一直希望能有研究一种食用菌专用无菌消化物培养基，该培养基营养丰富，可各类食用菌的增菌培养。

背景技术   本发明的目的在于提供一种食用菌无菌消化物培养基，该培养基是一种营养丰富的消化汤，一般实验室及培育场均可使用。由于含有胰蛋白胨和大豆蛋白胨，在不加蛋白等营养物的该消化汤中即可有许多不易生长的食用菌得以茂盛生长。用于食用菌培养时，需经常检查培养物，食用菌的最旺生长时期比其他营养差的消化汤要早，因此衰退期也较快。用于食用菌培养时，另外加少量琼脂，在消化汤灭菌或加热冷却后应立即使用。用于菌种活化时，该消化汤培养基具有刺激细菌生长的特点。

无菌消化物培养基营养丰富、配制简单、选择性强,与传统试剂比较,检出率高,污染小,临床应用效果满意.大大提高检测阳性率，方法简单、时间短、准确性高。

发明内容    本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经加温、溶解、混合、冷却、分装、高温灭菌等工艺而成一种无菌消化物培养基。

本发明选择的试剂配方如下（克/每升蒸馏水）：胰蛋白胨15.0-20.0；大豆酪蛋白胨5.0-6.0；氯化钠4.0-5.0；磷酸氢二钠1.5-2.5；葡萄糖1.5-2.5；酵母粉3.0-4.0；蒸馏水加至1000 mL。 

食用菌无菌消化物培养基是一种营养丰富的消化汤，一般实验室均可使用。由于含有胰蛋白胨和大豆蛋白胨，在不加其他蛋白等营养物的该消化汤中即可有许多不易生长的食用菌得以茂盛生长。在灭菌前的消化汤中应加入抗凝剂柠檬酸钠。用于灭菌效果现场试验时，消化汤可不加磷酸盐和葡糖糖。

食用菌无菌消化物培养基，原材料易得，制作方便，基础成分调整加入营养丰富的胰蛋白胨、酵母浸膏粉， 酵母浸膏粉主要为食用菌生长繁殖提供可溶性含氮物质、核酸降解物、维生素及无机盐类等，以补充蛋白胨营养成分的不足部分。

磷酸盐为细菌良好的磷源且兼有缓冲作用。氯化钠的作用是调节渗透压，尤其是在制备含血的试剂时，需要等渗溶液，它还可构成菌体中作为酶的激活剂。

食用菌无菌消化物培养基对食用菌血红铆钉菇均能生长良好。在此基础上添加酵母粉浸出液能使菌丝生长更加浓密、健壮。在固体培养基配方中更有利于菌丝的生长。在棉籽壳加入木屑使生长速度明显减慢，但菌丝生长健壮；用食用菌无菌消化物培养基菌丝生长长速显著加快。可以考虑在菌根化育苗时使用。

本发明产品的制备方法是：

1)、将胰蛋白胨、大豆酪蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钠、葡萄糖、酵母粉各成分混合溶解； 

2)、调pH7.2±0.2，分装，121℃15min高压灭菌备用。 

本发明具有以下优点：(1) 食用菌无菌消化物培养基，营养丰富、配制简单；(2) 食用菌菌丝生长更加浓密、健壮，效果满意；(3)大大提高产量、稳定性好。

具体实施方式   下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明：

按照下表所列数据（克/每升蒸馏水）及其所述步骤进行配置：

配方一：

胰蛋白胨15.0-20.0；大豆酪蛋白胨5.0-6.0；氯化钠4.0-5.0；磷酸氢二钠1.5-2.5；葡萄糖1.5-2.5；酵母粉3.0-4.0；蒸馏水加至1000 mL