[发明专利]一种快速诊断胰腺创伤和急性胰腺炎的测试卡及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及临床诊断领域，尤其涉及一种快速诊断胰腺创伤和急性胰腺炎的测试卡及其制备方法

背景技术

胰腺创伤和急性胰腺炎是临床上常见的急危重病，若不及时治疗往往危及患者生命，因此对胰腺创伤和急性胰腺炎的及时诊断对于挽救患者的生命非常重要。

目前胰腺创伤和急性胰腺炎的常规诊断主要是测定腹腔渗出液及血液中的淀粉酶活性，以其活性的急剧升高作为诊断依据，但该方法的准确性欠佳，因为仍然有部分患者测得的淀粉酶活性没有较大的变化。另外还通过APACHE II评分对胰腺创伤和急性胰腺炎进行诊断，但该评分方法过于繁琐，若评分不足则容易导致患者病情延误；若评分过高则容易导致治疗过渡，因此该评分方法也不能满足对胰腺创伤和急性胰腺炎的快速诊断的要求。

近年来，随着研究的深入，发现在急性胰腺炎和胰腺创伤发生时，胰蛋白酶原被激活时产生一个小分子肽，叫做胰蛋白酶原激活肽(TAP)，该分子在腹水、血液以及尿液中含量的升高与急性胰腺炎和胰腺创伤的发生密切相关，通过TAP含量测定不仅可以诊断胰腺创伤和急性胰腺炎的病情，还可以对患者预后进行有效评估，因此有研究者开始把该分子作为急性胰腺炎和胰腺创伤的特异性诊断物并取得良好的效果。

目前对TAP的检测方法主要是酶联免疫吸附法(ELISA)，但该方法耗时较长(4～5小时)，还需要特定的吸光度检测仪器和专业人员操作，另外价格也较贵，因此不能满足对病情快速诊断的要求，更不适合在基层医疗机构使用。申请人在使用中发现，公开号CN101609093A的发明专利申请在实际使用中存在以下问题，因层析膜、吸水垫、过滤垫均由易吸湿的材料制备，在实际使用中常常因环境湿度较大和存放时间较长而降低材料的性能，继而影响测试卡的测试准确度实验发现使用依照CN101609093A的测试卡测试约100个样品，使用酶联免疫吸附法(ELISA)验证有近15％的假阳性(误差率)，而且使用依照CN101609093A的测试卡不能同时对待测样品作平行和对照测试，降低了测试的准确性。更不能实现对测试样品大致定量的作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种适合现场使用的，检测方便快速、灵敏度和准确度高、性能稳定、成本低廉的快速诊断胰腺创伤和急性胰腺炎的测试卡及其制备方法，该测试卡通过设置多个加样孔，可同时进行待测样品的平行测试和阴性、阳性对照测试，通过设置防水薄膜，以及使用微孔滤膜作为过滤垫，使测试结果更加准确可靠。

本发明所依据的原理是：待检样品中的TAP与结合垫上的胶体金标记的TAP单克隆抗体特异性结合，结合物以及被样品中的水份溶解的胶体金标记的单克隆抗体在层析作用的推动下向试纸另一端移动，当移动至包被TAP多克隆抗体的测试线时，形成双抗体夹心复合物并聚集显色，而游离的胶体金标记的TAP单克隆抗体在移动到质控线时与兔抗小鼠免疫球蛋白抗体捕获并显色以表明测试卡的有效性。

本发明的技术方案为：

一种快速诊断胰腺创伤和急性胰腺炎的测试卡及其制备方法，包括：

塑料外壳，所述塑料外壳上部设置有加样孔和观察窗，其中所述加样孔的数量为至少三个，所述多个加样孔沿所述塑料外壳宽度的方向等距离分布在所述塑料外壳的一端，所述加样孔和所述观察窗上固定有一层透明的防水薄膜；

底衬，所述底衬以粘接的方式固定于所述塑料外壳内底部；

检测模块，所述检测模块包括层析膜、结合垫、样品垫、过滤垫和吸水垫，所述结合垫、样品垫和过滤垫从下至上依次粘接在所述层析膜上面对应于所述加样孔的一端，其中所述过滤垫位于所述检测模块的最上层，并对应于所述加样孔的位置，所述吸水垫设置于所述层析膜上面的另一端，所述层析膜上设置有测试线和质控线，所述测试线为包被的TAP多克隆抗体，所述质控线为包被的兔抗小鼠免疫球蛋白抗体，所述层析膜与底衬粘接在一起。

优选的是，所述的快速诊断胰腺创伤和急性胰腺炎的测试卡中，所述底衬上设置有多个纵向平行排列的凹槽；所述检测模块为多个，其数量与所述底衬的凹槽数量一致，并分别粘贴于所述底衬的各个凹槽内，彼此之间由所述凹槽的侧壁隔开，所述加样孔对应于所述凹槽内检测模块上部的位置。

优选的是，所述的快速诊断胰腺创伤和急性胰腺炎的测试卡中，所述结合垫、样品垫和过滤垫的长度小于所述层析膜的长度，对应于所述塑料外壳上部加样孔的位置，且其边缘不超过所述观察窗的左侧边缘；所述吸水垫的长度小于所述层析膜的长度，且其边缘不超过所述观察窗的右侧边缘。