[发明专利]GDSL蛋白在制备脂肪酶中的新用途

权利要求书

1.GDSL蛋白的应用，为如下（1）或（2）：

（1）制备脂肪酶；（2）降解脂肪酶的底物；

所述GDSL蛋白是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列表的序列2所示氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有脂肪酶活性的由序列2衍生的蛋白质。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述（2）中，所述降解的反应条件为30-80℃、pH6.5-8.0。

3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述（2）中，所述脂肪酶的底物为对硝基苯基乙酸酯、丁酸对硝基苯酯、4-硝基苯基辛酸酯、4-硝基苯基葵酸酯、4-硝基苯基月桂酸酯和4-硝基苯基棕榈酸酯中的至少一种。

4.如权利要求1至3中任一所述的应用，其特征在于：所述GDSL蛋白为权利要求7所述方法制备得到的蛋白质。

5.将重组质粒导入大肠杆菌得到的重组菌；所述重组质粒为将GDSL蛋白的编码基因插入载体pET-28a(+)的多克隆位点得到的重组质粒；

所述GDSL蛋白是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列表的序列2所示氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有脂肪酶活性的由序列2衍生的蛋白质。

6.如权利要求5所述的重组菌，其特征在于：所述GDSL蛋白的编码基因是如下1）至4）中任一所述的DNA分子：1）序列表的序列3自5’末端第1至792位核苷酸所示的DNA分子；2）序列表的序列3所示的DNA分子；3）在严格条件下与1）或2）限定的DNA序列杂交且编码具有脂肪酶活性的蛋白的DNA分子；4）与1）或2）限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码具有脂肪酶活性的蛋白的DNA分子。

7.一种制备GDSL蛋白的方法，是培养权利要求5或6所述的重组菌，得到GDSL蛋白；所述GDSL蛋白是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列表的序列2所示氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有脂肪酶活性的由序列2衍生的蛋白质。

8.一种降解脂肪酶的底物的方法，是采用GDSL蛋白降解脂肪酶的底物；

所述GDSL蛋白是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列表的序列2所示氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有脂肪酶活性的由序列2衍生的蛋白质。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述降解的反应条件为30-80℃、pH6.5-8.0；所述脂肪酶的底物为对硝基苯基乙酸酯、丁酸对硝基苯酯、4-硝基苯基辛酸酯、4-硝基苯基葵酸酯、4-硝基苯基月桂酸酯和4-硝基苯基棕榈酸酯中的至少一种。

10.如权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述GDSL蛋白为权利要求7所述方法制备得到的蛋白质。