[发明专利]高强度高活性包埋微生物载体的制备方法有效
申请号: | 201210356723.6 | 申请日: | 2012-09-24 |
公开(公告)号: | CN102827823A | 公开(公告)日: | 2012-12-19 |
发明(设计)人: | 乔向利 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N11/08 | 分类号: | C12N11/08;C12N11/04 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人: | 祖志翔 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 强度 活性 包埋 微生物 载体 制备 方法 | ||
1.一种高活性高强度包埋微生物载体的制备方法,其特征在于:
步骤一,在80-90°C的60 ml或a ml去离子水中加入1.8 g-9 g聚乙烯醇,搅拌至溶解,得A溶液;
步骤二,在步骤一的60 ml 的A溶液冷却室温后,在其中加入4.5 g-9 g的丙烯酰胺单体及0.1 g-0.7 g 交联剂,搅拌至溶解,得溶液B;或者
在b ml的去离子水中,加入4.5 g-9 g丙烯酰胺单体及0.1 g-0.7 g交联剂,搅拌溶解,得溶液A’,其中a+b=60;
步骤三,将步骤一的a ml的A溶液与b ml的A’溶液共混,然后加入PBS缓冲液,至其pH至中性,得溶液C;或者
在步骤二的60ml的B溶液中加入PBS缓冲液,至其pH至中性,得溶液C;
步骤四,在溶液C 中加入1-8g的待包埋物,搅拌均匀,得混合液D;
步骤五,在混合液D中加入相应量的安息香二甲醚溶液,四甲基乙二胺,以及过硫酸钾饱和溶液,迅速搅拌均匀;其中过硫酸钾在所得溶液中的百分比为0.03-0.67%(m/v,g/ml), 安息香二甲醚在溶液中的百分比为0.1-1.2%(m/v,g/ml),四甲基乙二胺在溶液中的百分比为1-5%(v/v,ml/ml);
步骤六,将步骤五中得到的反应液置于辐照光源下辐照2-8分钟,进行固化;
步骤七,根据需要将固化后的包埋菌切割成相应的尺寸及大小。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述交联剂为N,N′-亚甲基双丙烯酰胺。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,聚乙烯醇在最终反应液中的浓度为:每100 ml溶液中含的聚乙烯醇的含量为3-15 g;丙烯酰胺在最终反应液中的浓度为:每100 ml溶液中含的丙烯酰胺单体的含量为8~14 g;交联剂在最终反应液中的质量体积百分数为0.2~1%(m/v,g/ml)。
4.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在步骤五中,所述的过硫酸钾、安息香二甲醚及四甲基乙二胺在步骤五所得的溶液中的含量分别是0.03-0.67%(m/v,g/ml),0.1-1.2%(m/v,g/ml),1-5%(v/v,ml/ml)。
5.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在步骤六中,所述照射时间为2-5分钟。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法制备的包埋微生物载体。
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