[发明专利]补阳还五汤的鉴别和含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药制剂质量控制领域，具体涉及一种补阳还五汤的鉴别和含量测定方法。 

背景技术

补阳还五汤出自《医林改错》下卷,由清代名医王清任所创制，由生黄芪、当归、赤芍、川芎、桃仁、地龙、红花组成，具有补气活血、化瘀通络之功效，主要用于治疗半身不遂，遗尿不禁等气虚血瘀证，是临床治疗老年中风症常用经验方剂。但是目前有关补阳还五汤的质量标准、有效成分等深入研究很少，有限的研究报道也只是一鳞半爪。而对于同时测定补阳还五汤中多种成分的报道尚未见到。无论从继承和发扬祖国医药的观点，还是从当前人民用药的需要，均有必要对补阳还五汤药用标准、化学成分及作用机理深人研究和探讨，以便开发利用。 

中药长期以来，质量难以有效控制，有效控制中药产品的质量是一个重大的课题，现有技术中采用的方法不完整，少数针对性不强，使用这些方法难以达到真正控制质量的目的。补阳还五汤由于缺少系统的质量控制方法，难以控制补阳还五汤的质量，以致正常的临床用药及疗效无法保证，利用已知的一些技术难以对补阳还五汤提供好的质量控制方法。 

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种补阳还五汤的鉴别和含量测定方法，为了达到这个目地，采用如下技术方案： 

一种补阳还五汤的鉴别和含量测定方法，所述补阳还五汤是由如下原料及方法制备，取黄芪120g，当归6g，赤芍5g，川芎3g、红花3g、桃仁3g、地龙3g，于砂锅中加相当于饮片10倍量的水，浸泡30min，煎煮30min，煎煮2次，两层纱布过滤，合并滤液，浓缩，定容至300mL，制备成补阳还五汤，包括以下鉴别方法和同时测定芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、槲皮素的含量测定方法： 

A.黄芪的TLC鉴别取上述补阳还五汤10mL，用水饱和的正丁醇振摇提取，每次20mL，提取3次，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤，每次20mL，洗涤2次，弃 去氨试液，取正丁醇提取液，水浴蒸干，残渣加蒸馏水3～5mL使之溶解，通过内径为1.5cm，长度为12cm的D101大孔树脂柱，加蒸馏水50mL洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30mL洗脱，弃去洗脱液，再用70%乙醇80mL洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，用甲醇定容至5mL容量瓶，作为补阳还五汤供试品溶液；另精密称取黄芪对照药材4g，粉碎，按上述补阳还五汤供试品溶液的制备方法，自用水饱和的正丁醇振摇提取开始，制成黄芪对照药材溶液，再按补阳还五汤制备方法制备缺黄芪的补阳还五汤阴性样品，取缺黄芪的补阳还五汤阴性样品溶液20mL，同样方法制成缺黄芪的阴性对照溶液，分别吸取上述溶液各10μL，点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为30∶10∶1的二氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硫酸乙醇溶液，于105℃加热显色，至斑点清晰，结果，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰； 

B.当归薄层色谱鉴别取上述补阳还五汤25ml，加热蒸干，加入乙醚10mL，加热回流提取30min，放冷滤过，滤液水浴蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另精密称取当归对照药材0.5g，粉碎，按上述补阳还五汤供试品溶液的制备方法，自用水饱和的正丁醇振摇提取开始，制成当归对照药材溶液，再按补阳还五汤制备方法制备缺当归的补阳还五汤阴性样品，取缺当归的补阳还五汤阴性样品溶液25mL，同样方法制成缺当归的阴性对照溶液，分别吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4∶1的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置于波长为365nm的紫外光灯下检视，结果，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显示相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰； 

C.赤芍的TLC鉴别取上述补阳还五汤30mL，加热蒸干，加入70%甲醇20mL，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2mL使溶解，作为供试品溶液。另精密称取赤芍对照药材0.5g，粉碎，按上述补阳还五汤供试品溶液的制备方法，自用水饱和的正丁醇振摇提取开始，制成赤芍对照药材溶液，再按补阳还五汤制备方法制备缺赤芍的补阳还五汤阴性样品，取缺赤芍的补阳还五汤阴性样品溶液20mL，同样方法制成缺赤芍的阴性对照溶液，吸取上述3种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8∶1∶4的二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于105℃加热显色，至斑点显色清晰，结果，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色的斑点，阴性对照无干扰；