[发明专利]纳米金颗粒在DNA折纸芯片上的可控分布方法有效
申请号: | 201210362952.9 | 申请日: | 2010-10-12 |
公开(公告)号: | CN103014146A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 贺林;李璨;冯晓录;陈培华 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C40B50/06 |
代理公司: | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人: | 郑立 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纳米 颗粒 dna 折纸 芯片 可控 分布 方法 | ||
1.一种纳米颗粒在DNA折纸芯片上的可控分布方法,其特征在于,包括如下步骤:
第一步,利用DNA折纸术构造一个非对称二维图形,制备DNA折纸芯片,
第二步,制备胶体金探针,
第三步,DNA短链与胶体金探针杂交,
第四步,粒径胶体金探针与非对称二维图形DNA折纸芯片连接,
第五步,原子力显微镜成像,
所述的胶体金探针,在胶体金探针连入地图之前,先将一个10nt短链,在50℃时,杂交固定在靠近金颗粒底部寡核苷酸探针上。
2.根据权利要求1所述的纳米颗粒在DNA折纸芯片上的可控分布方法,其特征是,所述的DNA折纸芯片,其制备方法如下:
(1)把所有要用的100μM订书钉链,包括形成非对称二维图形的、伸出探针的等体积混合,再稀释20倍备用;
(2)在96孔板上混合总量为30μl的溶液:0.025μM订书钉链:22μl;1/2浓度的M13mp18:1μl;1×TAE-Mg2+buffer:7μl。
3.根据权利要求1所述的纳米颗粒在DNA折纸芯片上的可控分布方法,其特征是,所述的胶体金探针,其制备方法:
①寡核苷酸与5nm粒径胶体金摩尔浓度比200比1加入10mM磷酸缓冲液中,室温300rpm摇24小时;
②加入终浓度0.1M NaCl,室温300rpm摇48小时;
③4℃,15000rpm离心10分钟,弃上清;
④加入10mM磷酸缓冲液,终浓度0.1M NaCl清洗两次;
⑤加入1×TE;10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH=8.0,4℃保存;
⑥5nm粒径胶体金探针浓度利用520nm波长紫外吸收峰测定。
4.根据权利要求1所述的纳米颗粒在DNA折纸芯片上的可控分布方法,其特征是,所述的杂交是指:5nm粒径胶体金探针与10nt DNA短链摩尔浓度比1比1混合,50℃水浴杂交1小时。
5.根据权利要求1所述的纳米颗粒在DNA折纸芯片上的可控分布方法,其特征是,所述的连接是指:5nm粒径胶体金探针与非对称二维图形DNA折纸芯片摩尔浓度比2比1混合,37℃水浴杂交1小时。
6.根据权利要求1所述的纳米颗粒在DNA折纸芯片上的可控分布方法,其特征是,所述的原子力显微镜成像是指:吸取2-5μl样品滴到新切云母表面,吸附2分钟后即可拿到原子力显微镜下成像。
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