[发明专利]解磷菌株PAN 4及其在核桃促生中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物领域，尤其涉及的是Pseudomonas vancouverensis Mohn et al解磷菌株PAN 4及其在核桃促生中的应用。 

背景技术

磷是植物生长发育所必需的营养元素，缺磷可导致农作物产量明显降低。土壤全磷含量虽然较高，但多以难溶态存在于土壤中，难以被植物吸收利用。生产上通过施用磷肥来解决土壤缺磷问题，不仅会耗竭有限的磷矿资源，还可能造成环境污染，破坏生态平衡。解磷细菌（phosphate solubilizing bacteria）是一类能够将土壤中植物难以吸收的磷转化为可利用状态磷的有益微生物,它通过活化土壤磷元素或影响植物根系分泌物的种类和数量,增加植物根系对周围K、Ca 、Mg、Fe 、Zn 等营养元素的吸收,从而促进植物的生长发育。目前，在解磷微生物的研究中多以禾本科作物为接种对象，且对解磷微生物促生效应的研究仅集中在对植株株高和生物量的影响。前人的研究结果表明接种解磷菌剂对水稻、玉米、燕麦、绿豆、甘蔗等作物均具有明显的促生效应。而以木本植物作为接种对象研究解磷菌剂的促生效应，国内外报道甚少。 

核桃广泛分布于世界各地，是我国重要的经济林木之一，因对水土保持的作用和其果实的营养保健功能，越来越受到重视。但是核桃植株生长对磷元素的需求量较大，磷是制约其生长的重要因子，目前未见Pseudomonas  vancouverensis Mohn et al作为解磷菌剂在核桃上应用的报道。 

发明内容

本发明的解磷菌株PAN 4菌株于2008年6月5采用稀释平板法分离于四川南充核桃根际，经鉴定为Pseudomonas vancouverensis Mohn et a。已经于2012年9月11日保藏于中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.6546；分类命名为： Pseudomonas vancouverensis。 

本发明涉及的Pseudomonas vancouverensis Mohn et al  PAN 4新菌株，不仅解磷能力强，且高效促生核桃，改善根际微生物环境，促进植物生长，提高核桃苗光合生理特性和核桃苗磷素营养，具有促生优化根系微生态环境双重功能。 

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。 

实施例1  Pseudomonas vancouverensis Mohn et al  PAN 4（CGMCC NO.6546）液体制剂的发酵： 

①一级斜面种子：常规方法制作牛肉膏蛋白胨（蛋白胨 10 g，牛肉膏 3 g，NaCl 5 g，琼脂 15 g，蒸馏水 1000 mL，pH 7.0）斜面培养基，接种PAN4后在26-28℃下培养24小时制成一级种子。 

②二级液体种子：解磷细菌培养基[葡萄糖10 g，(NH₄)₂SO₄ 0.5 g，NaCl 0.3 g，KCl 0.3 g，FeSO₄·7H₂O 0.03 g，MnSO₄·H ₂O 0.03 g，MgSO₄·7H₂O 0.3 g，KH₂PO₄ 2.0 g，蒸馏水1000 mL]）经高压灭菌后，按75mL液体盛于300mL 三角瓶比例（通氧控制）装瓶，在无菌状态接种PAN4斜面种子，每瓶接种1支斜面种子，温度26-28℃，初始pH值7.5，120r/min振荡培养36h，制成PAN4液体种子。