[发明专利]一种检测食物中药物残留的试剂盒及其使用方法

说明书

 

技术领域

本发明涉及一种胶体金检测技术，尤其涉及一种间接标记的用于检测食物中药物残留的试剂盒及其使用方法，属于食品安全快速检测技术领域。

背景技术

目前，对于食物中药物残留的检测，例如，水产品中的呋喃唑酮的检测的方法，常见的有化学比色法、液相色谱法、酶联免疫法、胶体金法等。其中，前面三种方法存在一些缺陷，不能满足现场快速检测的要求，主要表现在：化学比色法的干扰比较多导致特异性变差，检测的灵敏度也不高，达不到市场的要求；液相色谱法的特异性好，灵敏度也比较高，但是需要特殊的仪器设备，专业的操作人员，检测费用很高，检测所需时间也比较长，一般需要隔天才能出检测结果，单个样本的检测费用基本都在2000左右，不适合广泛的推广；酶联免疫法需要使用酶标仪，需要专业的操作人员，操作时间比胶体金法要长2小时左右，不适合现场操作，费用也比胶体金法稍高，若检测样本较少，费用也将成倍高于胶体金法。胶体金法利用抗原与抗体的高度专一性特异反应来进行检测，具有高灵敏度和高特异性，操作过程简单，不需要使用特殊的仪器设备，所需时间较短，5～8分钟即可判读，事前需要进行样本处理的也能在2个小时内出结果，而且结果可用肉眼判读，适合现场检测，可以较好的实现我国食品安全领域快速、准确的检测要求。因为检测样本的原因，如：水产品容易死亡，特别是在流通的环节，必须使用快速方法进行检测，以上数种方法中也只有免疫胶体金法能够满足要求。

然而现有技术中，人们在使用胶体金法检测时，都是在单克隆抗体上用胶体金直接标记，不仅抗体用量大，且会导致被标记抗体的活性出现明显的下降，从而导致产品灵敏度降低。例如，申请号为200810224933.3的中国发明专利，公开了一种检测禽流感的试纸条及其制备方法，该试纸条包括以下部分：垫板、硝酸纤维素膜、两个结合垫和两片吸水滤纸，所述的硝酸纤维素膜含有金标记的AIV单克隆抗体、AIV血清和羊抗鼠IgG，所述的结合垫是含有脱脂酪蛋白、金标记的AIV单克隆抗体、AIV血清和羊抗鼠IgG的玻璃纤维膜。在使用该种方法时，就容易出现胶体金用量大，抗体活性降低的技术问题，从而导致灵敏度降低。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种间接标记的检测食物中药物残留的试剂盒。它具有检测灵敏度高的优点。

本发明的上述目的可以通过以下技术方案得以实现的。

一种检测食物中药物残留的试剂盒,包括检测板和金标微孔，检测板包括载体膜和胶体金结合垫，胶体金结合垫附着于载体膜上的一端，所述金标微孔上包被有单克隆抗体与胶体金的结合物；所述载体膜上设有检测区和质控区，检测区上固定有特异性结合抗原，质控区上固定有二抗；

所述单克隆抗体与胶体金的结合物具体为，胶体金标记在抗抗体上而所述抗抗体与单克隆抗体特异性结合，的一种结合物。

本发明的上述目的还通过以下技术方案得以实现的。

一种检测食物中药物残留的试剂盒, 包括检测板，检测板包括载体膜和胶体金结合垫，胶体金结合垫附着于载体膜上的一端，所述胶体金结合垫上包被有单克隆抗体与胶体金的结合物；所述载体膜上设有检测区和质控区，检测区上固定有特异性结合抗原，质控区上固定有二抗；

所述单克隆抗体与胶体金的结合物具体为，胶体金标记在抗抗体上而所述抗抗体与单克隆抗体特异性结合，的一种结合物。

本发明采用的方法是胶体金免疫层析法，胶体金是一种负电荷的疏水胶，靠静电粒子相互排斥作用来维持稳定的胶体体系，直径从几纳米到几十纳米不等。由于不同直径的胶体金的光散射各异，所以其溶胶颜色的深浅相应发生显著的变化，这就是胶体金用于被动凝集试验的基础。同时由于胶体金金颗粒对蛋白质有很强的吸附功能，可与SPA，Igg，毒素、糖蛋白、酶、抗生素和激素等多种物质非共价结合，从而使其成为免疫反应的优良标记物。