[发明专利]一种斯氏木碱的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于天然植物提取领域，具体涉及一种斯氏木碱的提取方法。

背景技术

斯氏木碱（Sickingine），分子式C₂₀H₂₂N₃，分子量304.42。斯氏木碱是从茜草科植物染料斯氏木Sickingia tinctoria (HBK)Schum.及威廉斯氏木Sickingia williamsii Standl.植物中分离得到的一种吲哚类生物碱。实验研究表明，斯氏木碱具有抑制回肠收缩作用，可抑制豚鼠离体回肠由点刺激引起的收缩，ED₅₀为100μM。

现有提取斯氏木碱的报道并不多见，市场上也尚未有斯氏木碱对照品的出售，因此提供一种斯氏木碱的提取方法则很有必要，可以为其后续研究提供支持。

目前，国内尚未见斯氏木碱的提取纯化方法方面的专利报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种斯氏木碱的提取方法，该方法操作简单、得率高、安全环保，可快速大量分离高纯度斯氏木碱。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

（1）提取：取威廉斯氏木药材粉碎成粗粉，用5-10倍量85-95%的乙醇溶液，25-55℃下进行连续逆流超声提取30-100min，得到乙醇提取液；

（2）氧化铝柱层析：上述提取液浓缩至浸膏，加氧化铝拌匀、干燥后装柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品；

（3）制备型液相色谱分离：上述粗品采用制备型液相色谱分离，紫外检测器在线监测，收集斯氏木碱组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，得斯氏木碱粗晶；

（4）重结晶：将斯氏木碱粗晶用氯仿-甲醇重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木碱晶体。

步骤（1）所述超声频率为50-80KHz。

步骤（2）所述氧化铝为80-120目，氯仿-丙酮体积比为1:1，用量为柱体积的4-8倍。

步骤（3）所述制备型液相色谱的流动相为乙腈-0.2%乙二胺水溶液，体积比为35:65，紫外检测波长为220nm。

步骤（4）所述氯仿-甲醇的体积比为2.5-3:1。

本发明的优点在于：

1）操作简单、耗时短，易于产业化放大；

2）提取、柱层析、制备液相分离等步骤中的溶剂用量少，并可回收再利用；

3）具有较高的经济效益和学术价值，本发明所得产品纯度高，可为斯氏木碱的进一步开发提供药理原料和实践支持。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明进一步说明：

实施例1：

取威廉斯氏木药材1kg，粉碎成粗粉，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入10倍95%乙醇溶液，55℃下进行连续逆流超声提取30min，超声频率为80KHz，得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，向浸膏中加氧化铝（120目）拌匀、干燥后装柱，用7倍柱体积的氯仿-丙酮（1:1）混合溶液洗脱，薄层检测，收集斯氏木碱流分，浓缩干燥得到斯氏木碱粗品。以乙腈-0.2%乙二胺水溶液为流动相，体积比为35:65，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10μm，柱长为15cm、直径为4cm，将粗品加入流动相至刚好溶解，溶解后的溶液经0.45μm微滤膜过滤，得到样品溶液，六通阀进样，进样体积为25ml，控制流速为50ml/min，紫外在线检测，检测波长为220nm，收集目标成分，减压回收试剂得斯氏木碱粗晶，用氯仿-甲醇（2.5:1）重结晶，冷冻干燥得到高纯度斯氏木碱晶体，经HPLC检测，纯度96.9%。

实施例2：