[发明专利]检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法无效
申请号: | 201210372059.4 | 申请日: | 2012-09-28 |
公开(公告)号: | CN102879585A | 公开(公告)日: | 2013-01-16 |
发明(设计)人: | 吴金节;王希春;寇亚楠;孙志阔;徐述亮;陈亮;王勇;马良友 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人: | 胡敏 |
地址: | 230036 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 大豆 抗原 蛋白 血清 抗体 间接 elisa 方法 | ||
1.一种检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法,其特征在于:是以经纯化的大豆抗原蛋白作为抗原包被,用以检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法。
2.根据权利要求1所述的检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法,其特征在于,所述大豆抗原蛋白包括大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白。
3.根据权利要求1或2所述的检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法,其特征在于,所述纯化步骤包括:将大豆抗原蛋白溶于PH为7.4的磷酸盐缓冲液,再使用Sepharose CL-6B凝胶过滤,用磷酸盐缓冲液洗脱得到的洗脱液经透析,冷冻干燥得大豆抗原蛋白,储存于-20℃作为抗原备用。
4.根据权利要求1或2所述的检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法,其特征在于,所述间接ELISA方法包括:包被抗原、封闭、加样、加酶标二抗、显色、终止。
5.根据权利要求4所述的检测大豆抗原蛋白血清抗体的间接ELISA方法,其特征在于,所述间接ELISA方法的工作条件为:抗原包被为2.0~10.0μg /L,封闭液为1%BSA,样品稀释浓度为1:400~1:3200,酶标二抗稀释浓度为1:1000~1:2500,显色液AB比例为等比,阴阳临界值为0.225~0.032。
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