[发明专利]一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法

权利要求书

1.一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法，包括以下步骤：

（1）首先，测试环境毒物对大肠杆菌的生长抑制作用，在培养管或微孔板内接种相同密度的大肠杆菌，当细菌进入对数生长期时，根据细菌对环境毒物的耐受性，加入稀释浓度的化合物、混合物、环境样品的提取物或馏分并绘制S型曲线，求算环境毒物对细菌生长抑制的EC20；

（2）取出冻存于-80摄氏度的存有大肠杆菌的培养管或微孔板，在室温下放置至其融化，迅速用复制触角将其转移复制入一块装有新鲜培养基的培养管或微孔板，培养细菌3个小时，此时，细菌进入对数生长期，将其分装入多孔微孔板；

（3）选择一个或多个测试浓度，在培养管或微孔板内快速加入受试环境毒物；

（4）将加过受试化合物的培养管或微孔板放入酶标仪，记录报告基因信号在此后随时间变化的情况。

2.根据权利要求1所述的一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法，其特征在于细菌进入对数生长期为当细菌吸光度OD600值达到0.1时。

3.根据权利要求1所述的一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法，其特征在于步骤（3）中0、0.01*EC20、0.1*EC20和EC20作为4个测试浓度。