[发明专利]检测肾上腺素受体激动剂的胶体金检测卡及样品处理方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测8种肾上腺素受体激动剂的胶体金检测卡及样品处理方法，属于瘦肉精检测技术领域。

背景技术

β-肾上腺素受体激动剂能够加强心脏收缩、扩张骨骼肌血管和支气管平滑肌，兽医学和医学上用于治疗休克和支气管痉挛。实验证实，肾上腺素受体激动剂类药物在动物体内对营养物质具有重新分配的作用，促进动物肌肉生长，促进动物体蛋白质沉淀，特别是骨骼肌中蛋白质的合成，抑制动物脂肪合成和积累，从而改善胴体品质，使生长速度加快，瘦肉相对增加10%以上。因其效果好，经济回报高，因而国内外不少养殖场都非法使用本类药物作饲料添加剂，造成畜禽肌肉组织中的残留，通过食物链对人体产生毒性作用，极大的影响动物源性食品的安全性。

人食用了β-肾上腺素受体激动剂残留的动物源性食品，可引起头晕、心跳加快、肌肉震颤、心悸、呼吸困难等症状，严重的可引起中毒，对人体危害极大。近年来随着不断发生的因食用残留β-肾上腺素受体激动剂的肉制品而造成的大规模中毒事件，欧盟、美国、中国等国家和地区都先后立法禁止在畜禽生产中使用促进动物生长的β-肾上腺素受体激动剂作为饲料添加剂。2002年我国农业部、卫生部发出的公告《禁止在饲料和动物饮水中使用的药品种目录》（农业部公告第176号）明确禁止盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、硫酸特布他林、硫酸沙丁胺醇、西马特罗、盐酸多巴胺7种肾上腺素受体激动剂在食品动物中的使用，2012年12月苯乙醇胺A被农业部第1519号公告列为“禁止在饲料和动物饮水中使用的物质”。

肾上腺素受体激动剂种类繁多，目前对于动物源性食品中肾上腺素受体激动剂的免疫胶体金检测卡，检测的主要还是单项物质或者几项物质，监管部门并不知道养殖户使用了何种肾上腺素受体激动剂，检测存在一定的盲目性，常常造成漏检。因此本发明的这种同时检测8种禁止在饲料和动物饮水中使用的肾上腺素受体激动剂的胶体金检测联卡具有非常迫切的市场需要与广泛的市场前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能同时检测8种肾上腺素受体激动剂的胶体金检测卡，克服现有技术只能逐一单项或者几项检测的缺陷。

本发明的8种肾上腺素受体激动剂的胶体金检测卡，包括包被了单克隆抗体胶体金标记物的胶体金结合垫、包被了盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、硫酸特布他林、硫酸沙丁胺醇、西马特罗、盐酸多巴胺和苯乙醇胺A蛋白质偶联物和兔抗鼠IgG的硝酸纤维素膜、样品垫、吸水棉、PVC胶板及塑料模具等组成，在PVC胶板的一端依次粘附样品垫、结合垫，中间黏贴硝酸纤维素膜，另一端粘附吸水棉。

8种禁止在饲料和动物饮水中使用的肾上腺素受体激动剂盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、硫酸特布他林、硫酸沙丁胺醇、西马特罗、硫酸沙丁胺醇和苯乙醇胺A的胶体金检测卡检测样品的处理方法，检测样品为尿液样品、饲料样品或动物组织、肝脏等样品，对于各种不同的检测样品有不同的处理方法。

针对尿液样品的处理方法是：取待检尿样，若样品比较混浊时，可3000 r/min以上，离心5 min或过滤，取上清进行检测。

针对饲料样品的处理方法是：准确称取2±0.05 g均质后的饲料样品于50 mL离心管中；加入10 mL 0.05 M HCl，充分涡动1 min；加入10 mL 0.05 M NaOH溶液调pH值至7-8充分涡动30 s，静置5 min，取3-4滴上清液进行检测。

针对动物组织、肝脏样品的处理方法是：准确称取2±0.01 g均质后的新鲜组织样品于50 mL离心管中；加入1 mL 50 mM，pH7.0 Tris-HCl样品抽提液，涡动至组织完全分散；经100℃水浴10分钟，冷却至室温，弃掉乳化层，取清亮的中间部分作为测试样品。

本发明的8种禁止在饲料和动物饮水中使用的肾上腺素受体激动剂的胶体金检测联卡能同时检测出尿液样品、饲料样品或动物组织、肝脏等样品中含有的盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、硫酸特布他林、硫酸沙丁胺醇、西马特罗、盐酸多巴胺和苯乙醇胺A，本双排四联检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便快速，结果准确，大大提高肾上腺素受体激动剂的检测率。

附图说明