[发明专利]高血压易感性无创检测试剂盒(GNB3等基因)无效
申请号: | 201210373802.8 | 申请日: | 2012-10-02 |
公开(公告)号: | CN103710425A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 石慧林 | 申请(专利权)人: | 解码(上海)生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201203 上海市浦东*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高血压 感性 检测 试剂盒 gnb3 基因 | ||
1.一种筛查高血压高危人群的基因无创检测试剂盒,其特征在于:检测GNB3基因上C825T (rs5443)、MTHFR基因上C677T (rs1801133)、TGF-Β1基因上T869C (rs1982073)的3个单核苷酸多态性位点基因型的特异性引物与DNA测序引物、Taq酶、dNTP混合液、反应缓冲液、SAP酶、ExoI酶、BigDye mix、EDTA溶液、70%乙醇溶液、100%乙醇溶液、HIDI溶液、ddH2O等。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的特异性引物对是指针对GNB3基因上C825T (rs5443)、MTHFR基因上C677T (rs1801133)、TGF-Β1基因上T869C (rs1982073)的3个单核苷酸多态性位点,能特异性扩增出包含这3个SNPs位点的DNA片段的引物对。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的DNA测序引物是针对GNB3基因上C825T (rs5443)、MTHFR基因上C677T (rs1801133)、TGF-Β1基因上T869C (rs1982073)的3个单核苷酸多态性位点而设计,能通过DNA测序技术特异性检测出上述3个SNPs位点基因型的DNA测序引物。
4.根据权利要求1所示的试剂盒,其特征在于,所含的3对特异性引物序列如下:
(1)GNB3(C825T)正向引物:5'TTCCTGCCGCTTGTTTGA3'
GNB3(C825T)反向引物:5'AAATGCCAGGAACCCAGAA3'
(2)MTHFR(C677T)正向引物:5'AGGGAGGCTTCAACTACGC3'
MTHFR(C677T)反向引物:5'GCGGTTGAGGGTGTAGAAGT3'
(3)TGF-Β1 (T869C) 正向引物:5'TTTCCGTGGGATACTGAGACA3'
TGF-Β1 (T869C) 反向引物:5'GCTTCCGCTTCACCAGCT3'。
5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所含的3条DNA测序引物序列如下:
(1)GNB3(C825T)测序引物:5'TTCCTGCCGCTTGTTTGA3'
(2)MTHFR(C677T)测序引物:5'AGGGAGGCTTCAACTACGC3'
(3)TGF-Β1 (T869C) 测序引物:5' TTTCCGTGGGATACTGAGACA3'。
6.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于试剂盒的组分和含量包括:
(1)PCR反应体系:10×PCR反应缓冲液2.5ul,25mM dNTP混合液0.2ul,5U/ul Taq DNA聚合酶 0.125ul,20uM特异性引物对,每条引物各0.25ul,ddH2O 19.175ul;
(2)PCR产物纯化体系:1 U/ul SAP酶0.75ul,10 U/ul ExoI酶0.375ul,ddH2O 3.875ul;
(3)测序反应体系:25% BigDye mix1ul,3.2uM DNA测序引物1ul,125mM EDTA溶液1ul,100%乙醇溶液15ul,70%乙醇溶液30ul,HIDI溶液8ul,ddH2O 2ul。
7.本试剂盒供一人份检测应用,试剂盒的保存温度为-20℃。
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