[发明专利]一种纯化恩夫韦肽的方法无效
申请号: | 201210375897.7 | 申请日: | 2012-10-08 |
公开(公告)号: | CN102827258A | 公开(公告)日: | 2012-12-19 |
发明(设计)人: | 徐红岩;任丽萍 | 申请(专利权)人: | 吉尔生化(上海)有限公司;上海吉尔多肽有限公司;滨海吉尔多肽有限公司 |
主分类号: | C07K14/00 | 分类号: | C07K14/00;C07K1/20;C07K1/16 |
代理公司: | 上海浦东良风专利代理有限责任公司 31113 | 代理人: | 张劲风 |
地址: | 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯化 恩夫韦肽 方法 | ||
1. 一种纯化恩夫韦肽的方法,其特征是包括如下步骤:
1)将恩夫韦肽粗品以稀氨水完全溶解后,以滤膜过滤后待用,以固定相为聚合物色谱柱,流动相为两相,磷酸盐缓冲液为A相,色谱乙腈为B相,进行梯度洗脱纯化,收集目的峰值含量大于80%的肽溶液;
2) 以固定相为反相硅胶色谱柱进行二次纯化同时转盐,流动相为两相,醋酸水溶液为A相,色谱乙腈为B相,收集目的峰值含量大于98%的肽溶液;
3)将最终的高纯度肽溶液减压旋蒸浓缩冷冻干燥,得粉末状成品肽。
2.根据权利要求1所述纯化恩夫韦肽的方法,其特征在于:所述步骤1)聚合物色谱柱为聚苯乙烯-聚乙烯苯为基质的聚合物树脂填料。
3. 根据权利要求1所述纯化恩夫韦肽的方法,其特征在于:所述步骤1)中磷酸盐缓冲液pH为7.5-8.0。
4. 根据权利要求1所述纯化恩夫韦肽的方法,其特征在于:所述步骤1)中梯度洗脱的B相体积百分浓度为30%~50%,检测波长为230nm。
5.根据权利要求1所述纯化恩夫韦肽的方法,其特征在于:所述步骤2)中反相硅胶色谱柱为十八烷基键合硅胶填料。
6. 根据权利要求1所述纯化恩夫韦肽的方法,其特征在于:所述步骤2)中醋酸水溶液体积百分浓度为2.0%,梯度洗脱的B相体积百分浓度为5%-20%-25%,检测波长为230nm。
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