[发明专利]一种浸溶油页岩的复合菌剂及浸溶方法

权利要求书

1.一种浸溶油页岩的复合浸矿菌剂，其特征在于，其活性成分为胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)和氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxifans)。

2.一种浸溶油页岩中硅酸盐的胶冻样芽孢杆菌浸矿菌剂的筛选和驯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、筛选，在某一露天具有油页岩伴生矿的煤矿采集已经严重风化的油页岩置于装有玻璃珠和90ml蒸馏水的250ml三角瓶中，在30℃恒温振荡器中振荡培养24小时，接种于含有油页岩粉末缺钾、氮的选择性培养液中，再培养5天，即为油页岩浸矿菌群A；

b、驯化，取步骤a的油页岩浸矿菌群A混菌菌液5ml，8000rpm离心5min，用灭菌的选择性硅酸盐培养基洗涤2次，油页岩浸矿菌群A接种到新鲜含有油页岩粉末的选择性硅酸盐培养液中，在30℃，120rpm摇床里培养7天，重新传代，共驯化5次；

c、驯化结束后，将所得驯化菌群平板划线分离纯化，得到1株硅酸盐高效单菌，4℃冰箱保存。

d、经鉴定该株硅酸盐高效单菌为：胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)。

步骤b中所述的：选择性硅酸盐培养液配方为：蔗糖10.0g，Na₂HPO₄2.0g，MgSO₄·7H₂O0.2g，NaCl0.1g，蒸馏水1000ml；

硅酸盐培养基配方为：蔗糖10.0g，K₂HPO₄2.0g，MgSO₄·7H₂O0.2g，NaCl0.1g，酵母膏0.5g，(NH₄)₂SO₄2g，蒸馏水1000ml。

3.一种浸溶油页岩中硅酸盐的胶质芽孢杆菌浸矿菌剂的保存方法，其特征在于，菌种采用砂土管保存，将浸矿菌剂在含有油页岩粉末的培养基中活化，取保藏的菌种置于100ml含有油页岩粉末的硅酸盐培养基的250ml摇瓶中，室温120rpm摇床活化1-3天。

4.一种浸溶油页岩中硅酸盐的胶质芽孢杆菌浸矿菌液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

e、将权利要求2中的胶质芽孢杆菌浸矿菌液接种于硅酸盐培养基中活化，并传代2次；

f、将活化后的胶质芽孢杆菌浸矿菌剂重新接种于新鲜的硅酸盐培养基，振荡培养至对数生长期；

g、将步骤f中振荡培养至对数生长期的菌种按照5％-8％的接种量接入含有硅酸盐菌发酵培养基的发酵罐中，发酵温度为30℃，设定D0值为6mg/L，发酵时间为48-50h，培养至对数生长期，获得发酵液中胶质芽孢杆菌的浓度达到10⁸/ml； 

h、将获得的发酵液用地下水稀释十倍后即制得浸矿用工作液，直接用于生物浸矿。

步骤g中的发酵培养基配方为：淀粉2.88g/L；麦芽糖2.08g/L；硝酸铵0.24g/L；亚硝酸钠0.47g/L；尿素0.18g/L，用地下水配制。

5.一种浸溶油页岩中酸溶性成分的氧化亚铁硫杆菌浸矿菌剂的筛选和驯化，其特征在于，包括以下步骤：

①、筛选，取某一铜矿尾渣酸性废水置于装有90ml蒸馏水的250ml三角瓶中，在30℃恒温振荡器中振荡培养24小时；接种于9K培养基中，再培养5天，即为油页岩浸矿菌群B；

②、驯化，取步骤a的B混菌菌液5ml，8000rpm离心5min，用灭菌的9K培养基洗涤2次，油页岩浸矿菌群B接种9K培养基中，在30℃，120rpm摇床里培养7d，重新传代，共驯化5次；

③、驯化结束后，将所得驯化菌群平板划线分离纯化，各得到1株高效浸矿产酸单菌，4℃冰箱保存；

④、经鉴定该株高效浸矿产酸菌为：氧化亚铁硫杆菌Thiobacillus ferrooxidans。

6.一种浸溶油页岩中酸溶性成分的氧化亚铁硫杆菌浸矿菌剂的保存方法，其特征在于，菌种采用砂土管保存，取保藏的菌种置于100ml9K培养基的250ml摇瓶中，室温120rpm摇床活化1-3天。