[发明专利]赤芍总苷的一种制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种提取纯化赤芍总苷的制备方法。

背景技术

赤芍为毛茛科芍药(Paeonia lactiflora Pall.)或川赤芍(P.veitchii Lynch)的干燥根，味苦，微寒，归肝经，具有清热凉血，散瘀镇痛之功效。赤芍总苷(Total Paeony Glycoside，TPG)为赤芍的总提取物，主要为单萜苷类化合物，包括芍药苷(3.1％-7.0％)、芍药内酯苷(0.1％)、羟基芍药苷(0.06％)、苯甲酰芍药苷(0.01％)等组成。赤芍总苷的药理作用有以下几个方面：1.对血液的作用，包括抗凝血、抗血栓作用、抗内毒素作用、改善微循环；2.对缺血性损伤的保护作用，TPG对多种组织器官的缺血性损伤有保护作用，包括对肾缺血的保护作用、对缺血心肌的保护作用、对脑缺血性损伤的保护作用；3.抗肿瘤的作用；4.肝脏保护作用，其作用机制可能与抗脂质过氧化有关；5.改善小鼠学习记忆能力；6.抗抑郁作用，因此，赤芍总苷可作为治疗多种疾病的原料药，市场前景广阔。

赤芍总苷质量由于受药材来源、生产工艺及质量分析方法等多种因素的影响，以致其质量不统一。赤芍总苷提取工艺多为水提或醇提后萃取分离，或以乙醇提取后经大孔吸附树脂分离，这些技术无法完全破坏细胞壁的束缚，无法最大限度地提取出有效成分并进行充分的分离，因而所得产品纯度不高。本发明采用微波辅助提取技术制备赤芍总苷，再经微滤和大孔吸附树脂联用精制产品，克服现有技术不足，操作简单，同时提高产品的纯度和产率，有利于大规模工业化生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简单有效，产品纯度高的赤芍总苷的制备方法，以克服现有技术生产率低，产品纯度差，不利于推广生产等问题。

为实现上述目的，本发明提供了一种赤芍总苷的制备方法，具体步骤如下：

(1)粉碎：取赤芍根去杂质，干燥，粉碎至60-80目；

(2)微波提取：向赤芍粉末中加入5-15倍水，搅拌均匀，功率为250-350W条件下微波提取30-60s；

(3)离心：提取液6000-8000r/min离心10-20min，收集上清液；

(4)微滤：离心后上清液过孔径为0.2μm的无机陶瓷微滤膜，操作压力0.08-0.15Mpa，以错流速度0.6-1.0m/s进行循环微滤，收集滤液；

(5)大孔吸附树脂分离：滤液过非极性大孔吸附树脂，先以蒸馏水4-6BV，再以30％乙醇4-8BV洗脱，洗脱流速3-6ml/min，收集洗脱液；

(6)冷冻干燥：在-50℃条件下冷冻干燥，得赤芍总苷。

本发明的有益效果为：

(1)在提取过程中以水为提取溶剂，与传统的乙醇回流提取相比较，使用加工设备少，同时采用微波辅助技术，使原料中有效成分更充分和更容易地被提取出来，赤芍总苷得率达6.5％，使提取工艺具有快捷、高效、节能等特点；

(2)采用微滤和大孔吸附树脂联用精制赤芍总苷，与传统的单一大孔吸附树脂分离相比较，可以有效地除去杂质，选择性地保留有效成分，提高产品纯度，使赤芍总苷纯度达88％以上，为大规模生产提供新的工艺思路。

附图说明

附图1是以赤芍为原料，首先将赤芍根粉碎，加适量水，用微波辅助提取，然后将提取液高速离心分离，收集上清液，无机陶瓷膜微滤，滤液上大孔吸附树脂柱洗脱，冷冻干燥制得赤芍总苷的工艺流程图。

具体实施方式

提出以下实例用于说明本发明，但本发明的内容并不局限于此。

实施例1

(1)粉碎：取赤芍根1000g，去杂质，干燥，粉碎至60目；

(2)微波提取：向赤芍粉末中加入5倍水，搅拌均匀，功率280W条件下微波提取30s；

(3)离心：提取液8000r/min离心10min，收集上清液；

(4)微滤：离心后上清液过孔径为0.2μm的无机陶瓷微滤膜，操作压力0.08Mpa，以错流速度0.6m/s进行循环微滤，收集滤液；

(5)大孔吸附树脂分离：滤液过非极性大孔吸附树脂HPD100，先以蒸馏水4BV，再以30％乙醇5BV洗脱，洗脱流速3ml/min，收集洗脱液；

(6)冷冻干燥：在-50℃条件下冷冻干燥，得赤芍总苷32.56g，纯度88.9％。

实施例2

(1)粉碎：取赤芍根1000g，去杂质，干燥，粉碎至60目；

(2)微波提取：向赤芍粉末中加入8倍水，搅拌均匀，功率为300W条件下微波提取40s；