[发明专利]包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法及PSA胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒有效
申请号: | 201210379893.6 | 申请日: | 2012-10-09 |
公开(公告)号: | CN102901810A | 公开(公告)日: | 2013-01-30 |
发明(设计)人: | 高爱民;孙国敬;张小锐;徐丽;刘希 | 申请(专利权)人: | 北京九强生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/531 | 分类号: | G01N33/531;G01N33/577;G01N21/82 |
代理公司: | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人: | 程伟 |
地址: | 100083 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 包被 前列腺 特异性 抗原 抗体 胶乳 颗粒 制备 方法 psa 增强 免疫 检测 试剂盒 | ||
1.一种包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其特征在于,包括步骤:
1)将胶乳颗粒溶于MES缓冲液中;
2)将前列腺特异性抗原抗体溶于MES缓冲液中;
3)将步骤2)获得的混合物立即加入到步骤1)获得的混合物中进行反应;
4)向步骤3)的反应体系中加入甘氨酸缓冲液终止反应;
5)离心去掉上清;
6)获得包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒。
2.根据权利要求1所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中步骤1)中所述的MES缓冲液还含有甘油。
3.根据权利要求2所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中甘油含量为0.01%至0.5%。
4.根据权利要求3所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中甘油含量为0.15%。
5.根据权利要求1所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中步骤1)和步骤2)中所述的MES缓冲液为0.05MMES缓冲液pH6。
6.根据权利要求1所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中步骤3)所述的反应为在25-40℃下进行1-3小时。
7.根据权利要求6所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中步骤3)所述的反应为在37℃进行2小时。
8.根据权利要求1所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中步骤4)所述的甘氨酸缓冲液为0.1M甘氨酸缓冲液pH7。
9.根据权利要求1所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中步骤4)所述的终止反应进行0.5-2小时。
10.根据权利要求9所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中步骤4)所述的终止反应在搅拌条件下进行1小时。
11.根据权利要求1所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中所述胶乳颗粒是聚苯乙烯胶乳颗粒。
12.根据权利要求11所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中所述聚苯乙烯胶乳颗粒表面修饰有选自如下化学基团中的一种:硫酸基、磺酸基、羧基、氨基、羟基、酰肼基和氯甲基。
13.根据权利要求11所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中所述聚苯乙烯胶乳颗粒直径范围为50-250nm。
14.根据权利要求1所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中所述前列腺特异性抗原抗体为前列腺特异性抗原多克隆抗体或前列腺特异性抗原单克隆抗体。
15.根据权利要求14所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中所述前列腺特异性抗原抗体为前列腺特异性抗原单克隆抗体。
16.根据权利要求1所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中在步骤5)和步骤6)之间还包括用甘氨酸缓冲液洗涤胶乳颗粒的步骤。
17.根据权利要求16所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中所述甘氨酸缓冲液为含有氯化钠、EDTA、BSA、吐温和叠氮化钠的100mM甘氨酸缓冲液pH7。
18.根据权利要求17所述的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法,其中所述甘氨酸缓冲液为含有0.9%氯化钠、50mM EDTA、0.5%BSA、0.5%吐温20和0.09%叠氮化钠的100mM甘氨酸缓冲液pH7。
19.一种测定人血液样本前列腺特异性抗原含量的胶乳增强免疫比浊法试剂盒,其特征在于,包括R1试剂和R2试剂;
所述R1试剂包括缓冲液、稳定剂、促凝剂和防腐剂;
所述R2试剂包括根据权利要求1至18任一项所述的制备方法而获得的包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒、缓冲液、稳定剂和防腐剂。
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