[发明专利]核酸等温扩增产物的可视化检测方法

权利要求书

1.核酸等温扩增产物的可视化检测方法，其特征在于：用1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠或其衍生物或4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐或其衍生物检测核酸扩增的副产物焦磷酸根，试剂1或试剂2在反应前加入到反应体系中，通过试剂1或试剂2、焦磷酸根和镁离子相互作用产生的颜色变化判断扩增结果。

2.根据权利要求1所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠在扩增反应前加入反应体系中，59-65℃扩增20-60分钟。

3.根据权利要求2所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：等温扩增反应开始时，1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠与镁离子结合成为红色络合物，随着反应的进行，环介导等温扩增副产物焦磷酸根大量产生，与镁离子形成沉淀，1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠失去镁离子后，由红色变为蓝色。

4.根据权利要求1所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：对1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠进行修饰，转变成1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠衍生物后，检测核酸等温扩增的副产物焦磷酸根。

5.根据权利要求4所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠衍生物在反应前反应体系中，59-65℃扩增20-60分钟。

6.根据权利要求5所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：等温扩增反应开始时，1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠衍生物与镁离子结合成为红色或紫色络合物，随着反应的进行，等温扩增副产物焦磷酸根大量产生，与镁离子形成沉淀，1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠失去镁离子后，由红色或紫色变为蓝色或天蓝色。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：用1-(1-羟基-2-萘偶氮)-6-硝基-2-萘酚-4-磺酸钠或其衍生物可视化判断核酸等温扩增结果。

8.根据权利要求1所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐在扩增反应前加入反应体系中，59-65℃扩增20-60分钟。

9.根据权利要求8所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：等温扩增反应开始时，4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐与镁离子结合成为橘红色络合物，随着反应的进行，等温扩增副产物焦磷酸根大量产生，与镁离子形成沉淀，4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐失去镁离子后，由橘红色变为黄色。

10.根据权利要求1所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：对4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐进行修饰，转变成4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐衍生物后，检测核酸等温扩增的副产物焦磷酸根。

11.根据权利要求10所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐衍生物在反应前反应体系中，59-65℃扩增20-60分钟。

12.根据权利要求11所述的核酸等温扩增产物检测方法，其特征在于：等温扩增反应开始时，4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐衍生物与镁离子结合成为橘红色，随着反应的进行，等温扩增副产物焦磷酸根大量产生，与镁离子形成沉淀，4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠盐失去镁离子后，由橘红色变为黄色。

13.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：用4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚钠或其衍生物可视化判断核酸等温扩增结果。