[发明专利]葡萄糖传感器

说明书

技术领域

本文公开内容涉及含有米曲霉型FAD-GDH和钌化合物的葡萄糖传感器。

背景技术

作为在应用各种葡萄糖氧化酶的葡萄糖定量方法中使用的GDH(葡萄糖氧化酶)，公开了米曲霉的FAD-GDH。(专利文献1)。报道称，米曲霉的野生型FAD-GDH及其变体对麦芽糖和半乳糖的作用性低，而对葡萄糖的底物特异性高(专利文献2)。

葡萄糖传感器等生物传感器一般而言是在电绝缘性基板上形成包括作用极和对电极的电极系、并在其上配置包含GDH/GOD等氧化还原酶和媒介体的试剂层而构成的(专利文献3)。作为所述媒介体，使用铁氰化物/钌化合物等(专利文献4)。

在先技术文献

专利文献

专利文献1：日本特许第4292486号公报

专利文献2：日本特许第4348563号公报

专利文献3：WO2005/043146

专利文献4：WO2003/025558

发明内容

发明要解决的问题

一直以来，应用各种葡萄糖氧化酶类的葡萄糖定量法被进行着各种各样的讨论，并被市售。应用葡萄糖氧化酶类的葡萄糖定量法的原理是，利用葡萄糖被酶氧化的同时该氧化酶类的辅酶被还原的事实，具体而言，分类为测定被还原的辅酶或电子传递物质的吸光度的方法(比色法)和测定通过氧化还原反应而产生的电流的方法(电极法)。特别是近年来，作为用于糖尿病患者日常掌握自己血糖值的简易型血糖传感器，主要使用电极法。

作为葡萄糖氧化酶类，很早以来就应用葡萄糖氧化酶(GOD)。但是，在将GOD应用于电极法的情况下，存在如下问题：因为GOD可能以分子氧作为电子受体，试样中的溶解氧浓度将影响定量值。作为解决该问题的方法，多使用不以分子氧为电子受体的葡萄糖脱氢酶(GDH)。

作为GDH，大致上分类为三种类型：以吡咯并喹啉醌(PQQ)作为辅酶的物质(PQQ-GDH)、以黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作为辅酶的物质(FAD-GDH)、以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)作为辅酶的物质(NAD(P)-GDH)。GDH经常有底物特异性的问题。即，已知GDH将葡萄糖以外的麦芽糖/半乳糖也作为底物。作为能解决该底物特异性问题的GDH，发现了米曲霉的FAD-GDH(专利文献1)。因为米曲霉的野生型FAD-GDH及其变体(专利文献2)对麦芽糖和半乳糖的作用性低而对葡萄糖的底物特异性高，故而提出将其应用于葡萄糖传感器。

葡萄糖传感器等生物传感器一般而言是在电绝缘性基板上形成包括作用极和对电极的电极系、并在其上配置包含GDH/GOD等氧化还原酶和媒介体的试剂层而构成的(专利文献3)。作为所述媒介体，使用铁氰化物/钌化合物等(专利文献4)。

可通过将米曲霉的野生型FAD-GDH及其变体(下文中也称为“米曲霉型FAD-GDH”)与铁氰化物等媒介体(但钌化合物除外)组合，来制作能测定葡萄糖浓度的葡萄糖传感器(例如，专利文献1和2)。另外，如果前述的钌化合物与米曲霉型FAD-GDH以外的GDH或GOD组合的话，也能制作能测定葡萄糖浓度的葡萄糖传感器(例如，专利文献3和4)。但是，米曲霉型FAD-GDH和作为媒介体的钌化合物组合时，会有无法制作能够测定葡萄糖浓度的葡萄糖传感器的问题。组合了米曲霉型FAD-GDH和钌化合物的葡萄糖传感器不能测定葡萄糖浓度的问题迄今尚未知。

因此，本文公开内容中，作为一种实施方式，米曲霉型FAD-GDH和钌化合物组合使用的情况下也能提供能测定葡萄糖浓度的葡萄糖传感器。

解决问题的手段

本文公开内容中，作为一种实施方式，涉及一种葡萄糖传感器(下文中也称为“本文公开内容的葡萄糖传感器”)，其具备绝缘性基板、所述基板上配置的包括作用极和对电极的电极系以及所述电极系上配置的试剂层，所述试剂层包含米曲霉型FAD-GDH、钌化合物和PMS(吩嗪硫酸甲酯)。

本文公开内容中，作为其它实施方式，涉及葡萄糖浓度测定方法(下文中也称为“本文公开内容的葡萄糖浓度测定方法”)，所述方法是应用绝缘性基板上配置的包括作用极和对电极的电极系、葡萄糖脱氢酶和媒介体来测定试样中的葡萄糖的方法，其包括：使所述试样与米曲霉型FAD-GDH接触，以及借助于PMS和钌化合物、电化学地测定所述试样中的葡萄糖与所述米曲霉型FAD-GDH的反应。