[发明专利]一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种红豆杉植物成分的提取方法，具体的涉及一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法。 

背景技术

10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ（10-DABⅢ）是半合成抗癌药物紫杉醇（Taxol）和多西紫杉醇（docetaxel）的前体原料。紫杉醇最早从太平洋红豆杉树皮中提取出来的一种天然抗癌药物，多西紫杉醇是人工合成的新化合物。紫杉醇或多西紫杉醇能与肿瘤微管蛋白结合，并促进其聚合、抑制癌细胞有丝分裂，阻止癌细胞的增殖，它们有较广的抗癌谱，对顺铂、多柔比星等耐药肿瘤细胞株有效，临床上已用于肺癌、乳腺癌、头颈癌卵巢癌的治疗，其疗效好，副作用小。近年来研究表明，紫杉醇或多西紫杉醇对治疗其他疾病也有一定的潜力，如恶性黑色素瘤、类风湿性关节炎和早老性痴呆。紫杉醇被认为是迄今人类发现的疗效最好的抗癌药，随着紫杉醇和多西紫杉醇在临床上的应用，其原料得需求量也日益增加，野生红豆杉资源遭到了毁灭性的破坏，人工种植的红豆杉虽然成为解决紫杉醇原料短缺的重要途径，但是采用传统的方法，从红豆杉树皮中提取紫杉醇，资源耗费太大，而且人工种植周期长，仍然不能解决紫杉醇的原料问题。 

但是在许多红豆杉属的植物中，存在许多含量比紫杉醇高的紫衫烷类物质，它们结构相似，可以通过生物或者化学转化的手段转变成紫杉醇与多西紫杉醇，如10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ。 

10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ存在于多种紫衫属植物中，含量约为0.0052%-0.1185%，在传统的提取紫杉醇的生产工艺中常被当做废物丢弃掉，既浪费资源又污染环境。通过研究可以利用10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ半合成紫杉醇与多西紫杉醇，因此寻找一种简便快捷，成本低的从红豆杉中富集10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法，是世界范围内的一个研究热点。 

中国专利公开号 CN 1660827A公开了一种提取10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法，利用大孔树脂 S-8、AB-8、X-5、D4020、NKA-9或D3520对10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ进行吸附。中国专利公开号 CN 101230053A 公开，利用D101-1和D101型号的大孔树脂对10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ进行吸附。中国专利公开号 CN101235022A公开，利用AB-8型号大孔吸附树脂对10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ进行吸附。我们通过大量实验，对各种树脂进行筛选，发现MW-1树脂比以上所提到的树脂对10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的吸附效果更好，增加了10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ得提取效率，节约成本耗能较少，可连续大规模进行10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ提取生产。 

发明内容

为克服现有技术中的不足，本发明提供一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法。 

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现： 

一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法，包括以下步骤：

经干燥粉碎后的红豆杉枝叶，于50℃下用50%甲醇提取4次各2 h，浓缩液的滤液经过MW-1 树脂动态吸附，用30%乙醇进行淋洗除去杂质，再用50%乙醇洗脱得到目标产物，从而达到对10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的初步富集。

进一步的，所述10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ为中等极性物质，通过于50℃下用50%甲醇提取4次各2 h，可以将红豆杉中所述10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ 充分提出，而将其他极性的紫衫烷类物质留在植物固形物中，可作为后期提取紫杉醇等得原料，通过重复多次提取，使得提取溶剂与植物细胞充分的接触，使所述10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ迅速彻底的转移至提取溶剂中，使效率提高。 

进一步的，所用大孔树脂为 MW-1 型号大孔树脂，所述树脂对10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ具有特异性吸附，上样流速 1 mL/min，温度为35℃，采用梯度洗脱的方法：3 BV 的30%乙醇洗脱出去极性大的杂质，然后用9 BV 50% 乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，经过富集后所述10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ 的含量可以提高 8.76 倍以上。 

进一步的，所用工艺用于红豆杉枝叶，包括欧洲红豆杉、南方红豆杉、中国红豆杉、东北红豆杉、西藏红豆杉或曼地亚红豆。 

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：