[发明专利]一种R-3-奎宁环醇光学纯度的测定方法

说明书

技术领域：本发明涉及一种R-3-奎宁环醇光学纯度的测定方法。 

背景技术：(R)-3-奎宁环醇化学名为1-氮杂环[2.2.2]辛(R)-3-醇，是合成多种毒蕈碱受体拮抗药如索利那新、瑞伐托酯、他沙利定等的重要中间体，结构式见式1。(R)-3-奎宁环醇的合成是以3-奎宁环酮为原料经羰基还原生成(RS)-3-奎宁环醇后，再经拆分得到(R)-3-奎宁环醇，拆分后(R)-3-奎宁环醇的纯度均通过测定旋光度，计算ee值进行描述。测旋光度计算ee的方法值法测定(R)-3-奎宁环醇光学纯度有较大的误差，首先必须知道实验条件下纯对映体的比旋值，其次旋光度测量除了受偏振光波长、溶剂及溶液的浓度、温度等因素影响外，还受旋光性杂质的影响。 

随着手性液相色谱分离技术的发展，高效液相色谱法已成为能准确可靠测量对映体光学纯度的方法，但(R)-3-奎宁环醇的手性分离方法至今尚未建立。究其原因，一方面由于(R)-3-奎宁环醇没有紫外吸收，不适用于常规的液相色谱法检测；另一方面由于其手性中心缺乏能与手性色谱柱填料产生氢键、偶极-偶极作用、π-π作用或空间作用的基团，难以进行手性色谱法分离。 

式1 R-3-奎宁环醇结构式 

本发明的发明目的是：为了解决这一检测问题，我们开发了柱前衍生手性色谱法测定(R)-3-奎宁环醇光学纯度的方法，该方法是利用柱前衍生化法，使(RS)-3-奎宁环醇消旋体与苯甲酰氯反应生成(RS)-3-奎宁环醇苯甲酰氯衍生物即3-苯甲酸奎宁环酯，再利用手性色谱法进行光学纯度测定，首次创新性地解决了(R)-3-奎宁环醇光学纯度测定这一技术难题。 

发明内容

本发明的技术方案是： 

第一步：样品制备 

(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯的制备 

衍生化过程：向反应瓶中加入20ml二氯甲烷，接着加入1.0g3-奎宁环醇，水浴控温20-30 ℃，向反应瓶中加入0.47g氢化钠，控温20-30℃，向体系中滴入2.22g苯甲酰氯，20-30℃保温反应，直到TLC跟踪原料反应完全，反应工艺流程见式2。 

后处理过程：冰水浴条件下，向体系中滴加1mol/L的盐酸溶液，直至体系不放气为止，分出二氯甲烷相，水相用20ml二氯甲烷萃取一次，合并有机相。有机相用10ml饱和食盐水洗涤一次，减压浓缩干后得(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯。 

(R)-3-苯甲酸奎宁环酯对照品的制备 

衍生化过程：向反应瓶中加入20ml二氯甲烷，接着加入1.0g(R)-3-奎宁环醇对照品，水浴控温20-30℃，向反应瓶中加入0.47g氢化钠，控温20-30℃，向体系中滴入2.22g苯甲酰氯，20-30℃保温反应，直到TLC跟踪原料反应完全，反应工艺流程见式2。 

后处理过程：冰水浴条件下，向体系中滴加1mol/L的盐酸溶液，直至体系不放气为止，分出二氯甲烷相，水相用20ml二氯甲烷萃取一次，合并有机相。有机相用10ml饱和食盐水洗涤一次，减压浓缩干后得(R)-3-苯甲酸奎宁环酯。 

(R)-3-苯甲酸奎宁环酯的制备 

衍生化过程：向反应瓶中加入20ml二氯甲烷，接着加入1.0g(R)-3-奎宁环醇，水浴控温20-30℃，向反应瓶中加入0.47g氢化钠，控温20-30℃，向体系中滴入2.22g苯甲酰氯，20-30℃保温反应，直到TLC跟踪原料反应完全，反应工艺流程见式2。 

后处理过程：冰水浴条件下，向体系中滴加1mol/L的盐酸溶液，直至体系不放气为止，分出二氯甲烷相，水相用20ml二氯甲烷萃取一次，合并有机相。有机相用10ml饱和食盐水洗涤一次，减压浓缩干后得(R)-3-苯甲酸奎宁环酯样品。 

式2 3-奎宁环醇苯甲酰氯衍生化工艺流程 

第二步 供试品溶液制备 

准确称取(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯消旋体、(R)-3-苯甲酸奎宁环酯、(R)-3-苯甲酸奎宁 环酯样品适量，加乙醇溶解后分别制备为0.2mg/ml的溶液，作为供试品溶液。 

第三步 色谱条件准备及检测： 

(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯纯度测定液相色谱条件： 

色谱系统为高效液相色谱仪，色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈∶缓冲盐(20mM乙酸铵，氨水调节PH＝7.51)＝30∶70，流速＝1.0ml/min，柱温：35℃，检测波长为232nm，进样量20μl。面积归一化法计算纯度。 

(R)-3-苯甲酸奎宁环酯样品光学纯度测定