[发明专利]一种二次发酵提取骨钙的方法及骨钙素

权利要求书

1.一种二次发酵提取骨钙的方法，包括如下步骤：

(1)骨骼粉碎，乳酸菌发酵，加热灭菌；

(2)酶解；

(3)乳酸菌发酵，加热灭菌，干燥即得。

2.根据权利要求1所述的骨钙提取方法，其特征在于，步骤(1)所述的乳酸菌占骨料重量比为0.01～0.04％，骨料与水重量体积比1∶3～5。

3.根据权利要求1或2所述的骨钙提取方法，其特征在于，所述的发酵是35～50℃，发酵12h。

4.根据权利要求1所述的骨钙提取方法，其特征在于，步骤(1)所述的乳酸菌是乳双歧杆菌(B.lactis)、保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)和瑞士乳杆菌(L.helviticus)中的一种或几种。

5.根据权利要求4所述的骨钙提取方法，其特征在于，所述的三种乳酸菌的重量比为1∶3∶2。

6.根据权利要求1所述的骨钙提取方法，其特征在于，步骤(3)所述的乳酸菌为乳脂明串珠菌，发酵液中加入柠檬酸。

7.根据权利要求1或权利要求6所述的骨钙提取方法，其特征在于，所述的乳脂明串珠菌占骨料重量比为0.02～0.06％，乳脂明串珠菌和柠檬酸重量比1∶20～30。

8.根据权利要求1所述的骨钙提取方法，其特征在于，步骤(2)所述的酶解方案是pH值1～3，加入胃蛋白酶，水解温度35～40℃，搅拌1～2h；PH值6～7，加入木瓜蛋白酶，40～60℃，搅拌1～2h。

9.根据权利要求8所述的骨钙提取方法，其特征在于，所述的水解骨料所用的两种蛋白酶各占骨料重量比为0.04～0.08％。

10.一种由动物骨骼提取制备的骨钙素，其特征在于，采用以下方法制备：骨骼粉碎、灭菌；取乳双歧杆菌(B.lactis)、保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus)和瑞士乳杆菌(L.helviticus)，三种乳酸菌重量比1∶3∶2；骨料与水重量体积比1∶3～5，乳酸菌占骨料重量比为0.01～0.04％，加入总重量的5％的蔗糖，35～50℃，发酵12h，120℃灭菌30min；加盐酸调pH值1～3，加入胃蛋白酶，占骨料重量比为0.04～0.08％，水解温度35～40℃，搅拌1～2h，加碱调节PH值至6～7，加入木瓜蛋白酶，占骨料重量比为0.04～0.08％，40～60℃，搅拌1～2h，加热灭酶；加入总重量的5％的葡萄糖，加入乳脂明串珠菌和柠檬酸，乳脂明串珠菌占骨料重量比为0.02～0.06％，乳脂明串珠菌和柠檬酸重量比1∶20～30，发酵温度为39℃，发酵时间为12h，加碱中和，120℃灭菌，干燥即得。