[发明专利]一种分离纯化脱水达托霉素的方法

权利要求书

1.一种分离纯化脱水达托霉素的方法，包括下述步骤：

1)将达托霉素发酵液用陶瓷膜进行过滤，收集达托霉素滤液；

2)将上述达托霉素滤液pH调至6.0～8.0，经弱碱性树脂吸附、洗脱后得到脱水达托霉素的解吸液；

3)将上述解吸液经纳滤膜系统浓缩，得到脱水达托霉素浓缩液；

4)将上述浓缩液经制备色谱柱分离纯化后得脱水达托霉素制备液；

5)将上述制备液冻干干燥后得到固体脱水达托霉素。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述陶瓷膜膜孔径为0.01μm～0.1μm。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤1)中用水循环洗涤陶瓷膜，洗涤所用的水用量为发酵液体积的3～5倍。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述弱碱性树脂为FPDA13树脂，其装填内径和高度比为1∶7～1∶10。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中采用pH为6.5～8.0的0.06N的乙酸钠、0.2N～0.6N的氯化钠溶液洗涤树脂，收集色谱纯度＞40％的脱水达托霉素的解吸液。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中所述纳滤膜系统的截留分子量为200～500。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中，所述浓缩液经制备色谱柱分离纯化后得到的脱水达托霉素制备液，其色谱纯度＞98％。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)所述制备色谱柱条件为：色谱柱：Ib-SitC₈/6045-1、250*10.00mm；波长：214nm；流动相：乙腈、磷酸二氢氨缓冲液。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述流动相中乙腈与磷酸二氢氨缓冲液体积比为30∶70～40∶60。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，磷酸二氢氨缓冲液中磷酸二氢氨占3～5％。

11.如权利要求8所述的方法，其特征在于，磷酸二氢氨缓冲液的pH为3.0～4.0。