[发明专利]采用放射性内照射建立甲状腺功能减低Wistar大鼠眼眶模型的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种动物模型的构建方法，具体地说，是采用放射性内照射建立甲状腺功能减低Wistar大鼠眼眶模型的方法，用于观察眼眶受体分布和表达。

背景技术

临床上进行¹³¹I治疗GD甲亢过程中如发生甲减，极有可能存在TAO恶化的危险性，部分患者可能诱发Graves眼病（GO）的发生，其发病机制尚不十分清楚，预防和治疗都比较棘手，目前尚无比较合适的动物模型用以观察这类眼眶组织的病理改变。 

长期以来一直寻找¹³¹I治疗GD后甲减诱发GO的原因，并通过动物模型观察眼眶组织学变化了解其发病机制，目前已有多种方法制作了甲亢或甲减及其相关眼病的动物模型。

一、首先实验动物的选择上，主要是大鼠，因大鼠的甲状腺功能以及下丘脑-垂体-甲状腺轴与人类基本相似，且其价格低廉、分布广、繁殖快、体积小、易于饲养管理。

二、常用甲减模型：

1、低碘甲减模型：房辉等制作动物模型的方法为: Wistar 鼠食用重度缺碘地区粮食配制的饲料加去离子水，3月后即可成模。

2、化学诱导甲减模型：已成功证实以下化学物质能诱发甲减：丙基硫氧嘧啶( PTU) / 碘番酸( IOP) 、PTU、甲基硫氧嘧啶(MTU) 、他巴唑(MZ) 、甲状腺激素(TH) 、¹³¹I、过氯酸钠(NaClO₄) 。

Rebagliati 等取240～280g Wistar 雄鼠，腹腔注射¹³¹ I 1月，造模成功。¹³¹ I 法是通过¹³¹ I物理作用，其机理主要为发射β射线杀伤甲状腺细胞，使甲状腺素（TH）分泌减少。

3、先天性甲减模型：既可以用低碘饲料，也可以用化学诱导剂来诱发，不同的是所选动物为怀孕雌鼠。

4、转基因甲减模型。

5、甲状腺切除甲减模型：甲状腺切除甲减模型是经典的甲减模型, 切除绝大部分甲状腺必定造成甲减。

以上甲减模型用于甲亢经¹³¹ I仍不理想，没有良好地模拟疾病发展的自然状态。同时由于甲减病因复杂，目前的甲减动物模型还没有囊括所有病因的甲减，大多限于原发性甲减和TH 抵抗综合症的研究，对于继发性甲减和TSH 抵抗综合症则研究甚少。

三、方法对比总结。

低碘甲减模型(包括低碘先天性甲低模型)存在耗时、耗费等缺点。

化学诱导甲减模型(包括化学诱导甲减模型)存在耗时、耗资、不能较好模拟自然病程等缺点。

转基因甲减模型存在操作过程复杂、技术性强、成功率低等缺点。

虽然切除甲减模型简单易操作、造模成功率高可达100 %，但不是甲亢治疗后的自然甲减。

以上的模型均与实际的甲亢经内照射致甲减的眼病比较，其诱因和发展过程有较大区别。另外，各模型间造模成功的标准也不同。应该根据研究目的不同，制造不同的甲减动物模型。同时具备耗时耗费少、操作简单、成功率高、模拟疾病发展的自然状态的条件是才是理想的甲减动物模型。目前直接采用内照射甲亢动物的方法致甲减的眼眶模型，国内外尚未查到文献报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种采用放射性内照射建立甲状腺功能减低Wistar大鼠眼眶模型的方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：采用放射性内照射建立甲状腺功能减低Wistar大鼠眼眶模型的方法，所述的方法包括以下步骤：a、通过放射性¹³¹ I内照射Wistar大鼠；b、使用人类促甲状腺激素腹腔注射Wistar大鼠。

所述的步骤a中通过放射性¹³¹ I内照射Wistar大鼠的方法是腹腔注射¹³¹I碘化钠。

所述的¹³¹I碘化钠的腹腔注射剂量为300μci或500μci/每只。

所述的人类促甲状腺激素腹腔注射的时间是第6周。

所述的方法包括以下步骤：a、腹腔注射¹³¹I碘化钠注射液，注射剂量为300μci或500μci/每只；b、第6周，人类促甲状腺激素用0.9%生理盐水稀释到83.2μg/mL，大鼠腹腔注射，注射剂量为100μL/每只； c、用于观察眼眶生长抑素受体的分布。

本发明优点在于：

1、该动物模型制作简单，费用低，易重复；