[发明专利]麦角硫因的检测方法

权利要求书

1.一种菌丝体中的麦角硫因的高压液相色谱检测方法，包括以下步骤：

1)菌丝体的预处理步骤，包括将发酵液固液分离，收集菌丝体，再加入纯水悬浮并进行浸提而得到浸提液，然后经过超滤膜超滤，得到含有麦角硫因样品的超滤透过液；和

2)高压液相色谱检测步骤，对含有麦角硫因待测样品的透过液进行高压液相色谱分析，

其中在所述的高压液相色谱检测步骤中，高压液相色谱检测的条件如下：色谱柱为反相碳十八柱，采取两根柱子串联的连接方式进行检测；流动相溶液成分以体积分数计为甲醇/乙腈-纯水＝(0～10)∶(90～100)；流动相的pH范围为4.0～6.5；用于调节pH的酸或盐选自乙酸、乙酸钠、硼酸、甲酸、丁酸、乙二酸、和丙酮酸中的一种或多种；检测波长为250～260nm；柱温为15～40℃；流动相的流速为0.3～1.3mL/min；色谱图的记录时间为40min以下；麦角硫因的出峰时间为3～18min。

2.如权利要求1所述的方法，其中在所述的菌丝体的预处理步骤中，发酵液固液分离的方法选自离心、过滤和抽滤中的一种或多种。

3.如权利要求1所述的方法，其中在所述的菌丝体的预处理步骤中，浸提方法包括水浴浸提和/或磁力搅拌浸提。

4.如权利要求1所述的方法，其中在所述的菌丝体的预处理步骤中，浸提方法包括一次性浸提或反复浸提，浸提温度为50～100℃，浸提总时间为10～90min。

5.如权利要求4所述的方法，其中在所述的菌丝体的预处理步骤中，浸提温度为80～90℃。

6.如权利要求4所述的方法，其中在所述的菌丝体的预处理步骤中，浸提总时间为60～90min。

7.如权利要求1所述的方法，其中在所述的菌丝体的预处理步骤中，搅拌转数为0～600rpm。

8.如权利要求1所述的方法，其中在所述的菌丝体的预处理步骤中，超滤过程中用到的超滤膜的截留分子量为1.5kDa～30kDa。

9.如权利要求8所述的方法，其中在所述的菌丝体的预处理步骤中，超滤过程中用到的超滤膜的截留分子量为3kDa。

10.一种发酵液中的麦角硫因的高压液相色谱检测方法，包括以下步骤：

1)发酵液的预处理步骤，包括对发酵液直接进行浸提，然后经过超滤膜超滤，得到含有麦角硫因样品的透过液；和

2)高压液相色谱检测步骤，对含有麦角硫因样品的透过液进行高压液相色谱分析，

其中在所述的高压液相色谱检测步骤中，高压液相色谱检测的条件如下：色谱柱为反相碳十八柱，采取两根柱子串联的连接方式进行检测；流动相溶液成分以体积分数计为甲醇/乙腈-纯水＝(0～10)∶(90～100)；流动相的pH范围为4.0～6.5；用于调节pH的酸或盐选自乙酸、乙酸钠、硼酸、甲酸、丁酸、乙二酸、和丙酮酸中的一种或多种；检测波长为250～260nm；柱温为15～40℃；流动相的流速为0.3～1.3mL/min；色谱图的记录时间为40min以下；麦角硫因的出峰时间为3～18min。

11.如权利要求10所述的方法，其中在所述的发酵液的预处理步骤中，浸提方法包括水浴浸提和/或磁力搅拌浸提。

12.如权利要求10所述的方法，其中在所述的发酵液的预处理步骤中，浸提温度为50～100℃，浸提时间为10～90min。

13.如权利要求12所述的方法，其中在所述的发酵液的预处理步骤中，浸提温度为80～90℃。

14.如权利要求12所述的方法，其中在所述的发酵液的预处理步骤中，浸提时间为60～90min。

15.如权利要求10所述的方法，其中在所述的发酵液的预处理步骤中，搅拌转数为0～600rpm。

16.如权利要求10所述的方法，其中在所述的发酵液的预处理步骤中，超滤过程中用到的超滤膜的截留分子量为1.5kDa～30kDa。

17.如权利要求10所述的方法，其中在所述的发酵液的预处理步骤中，超滤过程中用到的超滤膜的截留分子量为3kDa。