[发明专利]短小芽孢杆菌及其在防控水产霍乱弧菌中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株短小芽孢杆菌、其制剂及其在防控水产霍乱弧菌中的应用，属于渔业生态安全和水产品卫生安全领域，用于改善渔业水质，抑杀水产养殖系统中的霍乱弧菌。 

背景技术

霍乱弧菌(VC)是引起人烈性传染病霍乱的病原体，在我国被列为甲类传染病，国际上被列为检疫传染病。霍乱弧菌的自然栖息地是水体生态系统，它是在水环境中土生土长的，是水生动物、浮游生物的共栖体。它以水生动物的甲壳质为营养基质，具嗜温、嗜碱、嗜营养盐的特性，能产生毒素使人致霍乱病；能分泌甲壳质酶腐蚀某些水生动物（甲鱼、虾、蟹、贝及浮游甲壳类等）的甲壳，破坏其保护层，引发疾病；能转化硝酸盐为有毒的亚硝酸盐使水质败坏，危害养殖对象。 

人类霍乱是经口感染的肠道传染病，主要经水、食物等而传播，正常人食入霍乱弧菌量超过10^8-9均可发病；霍乱自流行区向外扩散，主是通过水体与食品的污染以及病人与带菌者的扩散而实现，随着安全饮用水的普及，食物型（主要是水产品，尤其是甲鱼产品）传播日趋突出。 

目前，国内外对甲鱼等水产品携带霍乱弧菌的防疫尚处于对其苗种和产品检疫防疫阶段，但往往防不胜防。因为其养殖水体中滋生的病菌，不仅污染水产品，也对周围环境造成污染，扩大传播途径，增加霍乱流行风险。而且，一旦发现养殖水体或水产品霍乱弧菌检测阳性，政府需要立即采取紧急措施予以控制，一般采用化学药物对染疫水体及周边环境进行全面彻底消毒，扑杀、销毁染疫水体中所有水产品，同时需支付巨额疫病防控补偿。这样不仅造成极大的经济损失，也会对环境造成严重的药物污染或次生灾害。因此，能否在水产品上市之前，通过无公害的生物预防方法，在养殖生产环节使霍乱弧菌得到消除，切断其传播源，是杜绝水产品卫生安全隐患的关键所在和理想途径，也是国内外亟需攻克的重要课题。通过寻求拮抗菌以消除水产养殖系统中的霍乱弧菌，目前国内外尚未见有关研究报道。 

发明内容

本发明目的在于提供一种短小芽孢杆菌AB3（Bacillus pumilus AB3），该菌株可以以拮抗菌的作用有效的消除水产养殖系统中的霍乱弧菌，解决了现有技术中水产品携带霍乱弧菌的防疫问题。 

为了解决现有技术中的这些问题，本发明提供的技术方案是： 

一种短小芽孢杆菌AB3（Bacillus pumilus AB3），其保藏编号为CGMCCNO:6408，其具有抑制霍乱弧菌生长或繁殖的能力。 

本发明的另一目的在于提供一种霍乱弧菌拮抗菌制剂，其特征在于所述制剂包括药学上有效量的所述的短小芽孢杆菌AB3（Bacillus pumilus AB3）。 

本发明的又一目的在于提供一种所述的微生态霍乱弧菌抑菌制剂在水产品养殖系统中霍乱弧菌抑制方面的应用。 

所述的霍乱弧菌选自人类霍乱以及甲鱼、虾类、蟹类和贝类的甲壳腐烂症的病原菌。 

使用的微生物： 

使用的短小芽孢杆菌菌株，自市场购买的渔用微生态制剂，经分离培养和抑菌筛选得到，菌株代号为AB3。此菌经鉴定，其属于短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）的成员，命名为短小芽孢杆菌AB3（Bacillus pumilus AB3），简称BPAB3，现在已经保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO:6408，保藏日期为2012年8月10日，为霍乱弧菌拮抗菌菌株。短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）是一种饲用微生物菌种，适用于猪、禽类、反刍动物和鱼、虾等水产动物，可用于防治小麦根腐病、草莓灰霉病。 

短小芽孢杆菌AB3（Bacillus pumilus AB3）的生物学特性： 

短小芽孢杆菌AB3（Bacillus pumilus AB3），菌体呈杆状，圆末端，单个或呈短链排列，宽×长为（0.6~0.7）×（3-4）微米。能运动，革兰氏阳性，芽孢椭圆形，中生或次端生。该菌存在半透明型和不透明型两种不同的菌落形态，对两种菌落分别进行传代，半透明菌落能产生半透明和不透明型菌落，且基本各占一半。而不透明菌落在传代过程中只产生少许的半透明菌落，且传至第4代时半透明型菌落消失。该菌能水解淀粉，降解甘露聚糖、木聚糖、纤维素等。 

微生物的培养筛选方法: 

通过在琼脂培养基上打孔抑菌试验，从分离菌株中筛选出对霍乱弧菌抑制作用较强的拮抗菌。 

相对于现有技术中的方案，本发明的优点是：